你對制備色譜陌生嗎？還不進來看看它的特點

很多初接觸色譜領域的朋友對制備色譜這個名詞比較陌生。其實，在化學化工醫(yī)學等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜，換句話說，將分析色譜的進樣量增大，同時得出大量的所需物質（餾分）的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的，是分析出混合物中一個（或者幾個）純物質的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質。而制備色譜系統則是利用制備色譜的思想能得到純化物質的多個分析測試設備聯用的總稱。     分析色譜是制備色譜的基礎。當我們在分析色譜上取得了良好的分離效果時，可以將其放大，應用到制備色譜上，由此，我們需要考慮調整上樣量，流速，梯度：     

1.上樣量的調整：     他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內徑有關：     

具體關系時；制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長/分析柱長*制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方；     

2.流速的調整：     

制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方；     

3.梯度的調整：     

制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速；

制備液相知多少

色譜分析的目的

分析色譜的目的，是分析出混合物中一個（或者幾個）純物質的含量；制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進樣品量很大，導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大，也就必須加大色譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長度，使用的相對多的流動相。然而，當色譜柱上樣品負載加大的時候，往往導致柱效急劇下降而得不到純的產品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對重現性也要考慮。從經濟上來說。制備色譜要爭取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產品。

液相色譜在使用過程中四大關鍵因素

1.液相色譜儀本身：對于儀器本身一般不會有問題，特別是剛買回來的新儀器。對于儀器本身重要的就是儀器的校驗，剛買回來的儀器一般都是由賣家先對儀器做系統的確認工作（包括IQ、PQ、OQ），確認順利通過后，再請國家或省級儀器檢定局的來校驗，檢定合格后就可以放心使用了，除此之外，一些做得好的公司每半年會對儀器進行一次的內部校驗，目的就是為了保證儀器的正?？蛇\行狀態(tài)。

2.色譜條件：色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。

流動相就涉及到配制流動相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的干擾。

3.操作人員：首先，作為液相操作人員，一定要認真學習夜想的說明書，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常的維護保養(yǎng)，掌握基礎故障的排除和維修。

4.液相安裝環(huán)境：液相色譜儀應盡量安裝于水平、遠離振動、電磁干擾的屋內的臺面上，有條件的話盡量將液相數據處理系統分隔開，一個是防止色譜基線噪音偏大，基線不穩(wěn)等，一個是為減少對人體的危害。

液相色譜的五大系統

1、進樣系統進樣系統分為手動進樣閥和自動進樣器。

2、輸液系統輸液泵按輸出液恒定的因素分恒壓泵和恒流泵。對液相色譜分析來說，輸液泵的流量穩(wěn)定性更為重要，這是因為流速的變化會引起溶質的保留值的變化，而保留值是色譜定性的主要依據之一。因此，恒流泵的應用更廣泛。

輸液泵按工作方式分為氣動泵和機械泵兩大類。機械泵中又有螺旋傳動注射泵、單活塞往復泵、雙活塞往復泵和往復式隔膜泵。

3、分離系統分離系統包括色譜柱、保護柱以及柱溫箱。

色譜柱：色譜柱是樣品分離的核心。色譜柱在使用前必須仔細閱讀說明書，了解色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護方法等事項。色譜柱使用完后，需及時對色譜柱進行沖洗。沖洗完成后，應該將色譜柱從儀器上拆下來，兩端用廠家配的堵頭密封后，保存在色譜柱盒里。

保護柱：保護柱的作用主要是防止吸附性強的雜質對色譜柱污染，從而延長色譜柱的壽命。針對不同型號的色譜柱，應選擇相對應填料的保護柱。應注意柱芯也是有壽命的，應該定期進行更換。

柱溫箱：色譜柱溫度變化，可能會導致保留時間的變化。為了避免這個問題，建議使用柱溫箱。

4、檢測系統液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。

5、數據處理系統該系統可對測試數據進行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。