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在實(shí)際應(yīng)用中,有幾點(diǎn)需要注意:(1)流動(dòng)相過濾在實(shí)際操作中由于不可能做到專瓶,容易造成交叉污染,對(duì)于復(fù)雜的配比流動(dòng)相影響較大。因此,使用后一定要用水沖洗。在使用之前不放心的話也可以清洗。(2)流動(dòng)相過濾經(jīng)濟(jì)成本較高。購(gòu)買一套濾芯要3000多元,而且濾芯是比較容易損壞的設(shè)備。過濾器成本高,有的進(jìn)口一片就要幾十元。按照普通液相柱的正常使用壽命計(jì)算,過濾片的成本將遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜柱。而且在使用過濾片時(shí),有些會(huì)引起流動(dòng)相二次污染,原因是濾片不合格。(3)流動(dòng)相過濾耗時(shí)較長(zhǎng)。對(duì)于溶劑過濾器,有一個(gè)預(yù)清洗、安裝、使用、使用后清洗、烘干的過程,也至少要有一個(gè)小時(shí)。這一代價(jià)也不容忽視。
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造成堵塞的原因之二:使用流動(dòng)相時(shí)細(xì)菌污染。指出:剛開始流動(dòng)相無長(zhǎng)菌性細(xì)菌,在使用中產(chǎn)生細(xì)菌污染。在使用多元液相色譜儀時(shí),這主要是一個(gè)不健康的使用習(xí)慣。舉例來說:50%流動(dòng)的流動(dòng)相,有兩種使用方法。一種方法是在上機(jī)之前把水混合在一起,另一種方法是在流路 A放純,而流路 B放純水。就單純的實(shí)驗(yàn)效果而言,后一種具有明顯的優(yōu)勢(shì):一是簡(jiǎn)單,無需另一種計(jì)算比例混合,二是比例,可以得到保留時(shí)間的重復(fù)性的實(shí)驗(yàn)效果。但它有一個(gè)致命的缺點(diǎn),就是純水在流動(dòng)相瓶中存活數(shù)天(許多情況下,不僅用純水作為流動(dòng)相,而且用緩沖鹽溶液,本身就是的肥料,細(xì)菌生長(zhǎng)得更快),一旦出現(xiàn)細(xì)菌柱子,就會(huì)迅速分解。這樣就要求操作者每次實(shí)驗(yàn)都要用新配制的純水,更要求每次實(shí)驗(yàn)后要換水,換成沖洗干凈,這點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識(shí)不強(qiáng),但在多次使用中總有一兩次會(huì)漏掉,但往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。由于液相色譜柱的堵塞是不可逆的。
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1、固相萃取裝置采用什么上樣方式是合適的?
市場(chǎng)上的萃取方法主要有正壓上樣和負(fù)壓上樣兩種,但由于不能有效控制流速,導(dǎo)致回收率不穩(wěn)定,儀器重復(fù)性差,主流廠家一般采用正壓上樣的方式,聚同全自動(dòng)固相萃取儀采用高精度注射泵正壓上樣,因此主流廠家一般采用正壓法。
2、自動(dòng)固相萃取樣品的處理速度有哪些要求?
一個(gè)試樣的固相萃取周期一般是20分鐘左右,一般廠家的固相萃取儀器是一樣的。因此,儀器同步處理的樣品數(shù)越多,處理速度也就越快。聚同全自動(dòng)固相萃取采用6通道 3模式靈活萃取,提高了樣品處理速度。
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對(duì)萃取柱進(jìn)行活化處理:選一種溶劑經(jīng) SPE小柱潤(rùn)濕、活化后,試著將該填料與固相表面緊密接觸,容易吸附,也能去除柱中可能存在的雜質(zhì),減少污染;然后,選擇一種極性和 pH值與樣品基體相似的溶液替代溶劑,使樣品溶液與吸附劑表面良好接觸,提高萃取效率。SPE的一般做法是:采用選擇性吸附和選擇性洗脫的色譜分離原理,使液體樣品經(jīng)過吸附劑,保留其中的分析物,用適當(dāng)強(qiáng)度的溶劑洗去雜質(zhì),再用少量的溶劑洗脫,達(dá)到快速分離、凈化和濃縮的目的。固相萃取小柱還具有選擇性吸附干擾雜質(zhì)的作用,在使用合適的溶劑時(shí),讓分析物清洗,或同事吸附雜質(zhì)和分析物,選擇洗脫分析物的操作。
當(dāng)樣品經(jīng)過 SPE柱時(shí),固相對(duì)分析物吸附在固體表面,其它組分則隨樣品母液流經(jīng)柱,然后用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵摚滔噍腿∵^程中固相對(duì)分析物的吸引力要大i。SPE本身按其原理可分為四類:反向 SPE (RPSPE)、正 SPE (NPSPE)、離子交換性 SPE (IESPE)、吸附 SPE (Absorption)。固相萃取大多用于處理液體樣品,用于提取、濃縮和凈化樣品中的揮發(fā)性和半揮發(fā)性化合物;如果需要作為固體樣品使用,首先要將固體樣品處理成液態(tài)。隨著單一 SPE處理數(shù)量的增加,固相萃取小柱分析器的時(shí)效性將變得頻繁而復(fù)雜,人為誤差很大地影響處理樣品的重現(xiàn)性,不利于定量分析結(jié)果的定量分析工作。