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親和柱介紹
目前,于黃曲霉毒素分離純化的固相萃取產(chǎn)品有兩類:
二是多功能凈化柱(MFC)它是一種特殊的SPE柱,以極性、非極性及離子交換等兒類基團(tuán)組成填充劑,可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì),AFT不被吸附而直接通過,MFC的操作更為簡(jiǎn)便,不需要進(jìn)行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣,10秒鐘內(nèi)即可完成整個(gè)凈化過程,凈化效果理想。
親和柱的適用范圍
親和柱,適用于基質(zhì)復(fù)雜、要求低的樣品中真菌檢測(cè)的凈化。親和柱中含有抗體,能夠結(jié)合萃取液中目標(biāo)真菌。在凈化過程中干擾物質(zhì)從柱上淋洗下來,而目標(biāo)真菌能夠固定在柱上,之后通過適當(dāng)溶劑將目標(biāo)真菌從親和柱上洗脫下來,實(shí)現(xiàn)了與雜質(zhì)的分離。
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親和層析的產(chǎn)生背景
殘留檢測(cè)的確證方法主要是儀器分析法,如LC-MS、GC-MS或HPLC,這些方法中因殘留組分量很小,檢測(cè)方法需要較高靈敏度和準(zhǔn)確性。樣品前處理是檢測(cè)技術(shù)的核心,傳統(tǒng)的樣品凈化技術(shù)主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基質(zhì)固相分散(MSPD)、超臨界萃取(SFE)等。但是這些凈化技術(shù)通常需要多個(gè)凈化步驟,缺乏選擇性,不但費(fèi)時(shí)繁瑣、容易污染、損失樣本且會(huì)引起嚴(yán)重的本底干擾,降低結(jié)果的可靠性。因此建立有效的樣本凈化技術(shù)已成為痕量分析的主要問題。近20年,固相提取領(lǐng)域研究的不斷深入,推進(jìn)了從分析物中選擇性萃取目標(biāo)產(chǎn)物為目的的新技術(shù)發(fā)展(Hennion等,2003)。
親和柱親和層析原理介紹
組氨酸是具有雜環(huán)的氨基酸,每個(gè)組氨基酸含有一個(gè)咪唑基團(tuán),這個(gè)化學(xué)結(jié)構(gòu)帶有很多額外電子,對(duì)于帶正電的化學(xué)物質(zhì)有靜電引力,親和層析是利用這個(gè)原理來進(jìn)行吸附的,親和配體(也就是填料)上的陽(yáng)離子(一般是鎳離子)帶正電對(duì)組氨酸有親和作用。組氨酸標(biāo)簽是原核表達(dá)載體上6個(gè)組氨酸的區(qū)段,這個(gè)標(biāo)簽在ph8.0時(shí)不帶電,對(duì)蛋白質(zhì)的分泌,折疊,功能基本上無(wú)影響.能高度親和鎳離子,用于蛋白質(zhì)的親和純化.