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組織研磨儀采用垂直振蕩,使研磨管內(nèi)冷凍的樣品與研磨球型號(hào)碰撞,產(chǎn)生的剪切力和撞擊力使組織完全破碎。
組織研磨儀的使用方法如下:1.需將待測(cè)的樣品經(jīng)過簡(jiǎn)單切碎稱重后,放入50ml離心管中。2.然后加入兩粒15mm研磨珠,在高通量組織研磨儀上以1000 r/min研磨3分鐘,即可得到初步的農(nóng)殘檢測(cè)樣品。3.再經(jīng)過提取液分離、鹽類除水和吸附劑除雜之后,就可以得到清液,用于進(jìn)一步的檢測(cè)分析。再經(jīng)過提取液分離、鹽類除水和吸附劑除雜之后,就可以得到清液,用于進(jìn)一步的檢測(cè)分析。
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近年來,隨著科研工作的進(jìn)度日益加快,實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)工作量不斷加大,這就使得以往人工的工作不得不用機(jī)器來替代,以樣品研磨來說,傳統(tǒng)的方式是通過研缽來處理。無(wú)論是哪種類型的實(shí)驗(yàn)室,研缽都是為常見的工具。在處理少量樣品和一些粗放條件的樣品時(shí),研缽可以滿足基本要求,但目前很多實(shí)驗(yàn)室的樣品量都在日益增大,而且樣品相互之間的獨(dú)立性也要求更高,用研缽去處理時(shí),一是工作量十分巨大,再者很難保證樣品之間沒有交叉污染,使得工作效率和效果都不理想。小心吸取上層水相(無(wú)色)加入到新試管中,同時(shí)計(jì)算所吸取的水相體積。
旭鑫盛科——主營(yíng)各種研磨儀,粉碎儀,破碎儀,篩分儀等前處理設(shè)備,我們公司堅(jiān)持用戶為上帝,想用戶之所想,急用戶之所急,以誠(chéng)為本,講求信譽(yù),以產(chǎn)品求發(fā)展,以質(zhì)量求生存,我們熱誠(chéng)地歡迎與國(guó)內(nèi)外的各位同仁合作共創(chuàng)輝煌。
組織研磨儀的操作步驟及注意事項(xiàng)
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1. 將處理好的樣本、研磨球依次加入離心管中;
2. 將裝好樣品的離心管放入適配器中;
3. 將帶有樣品的適配器放入液氮中冷凍數(shù)分鐘;
4. 將冷凍后的樣品和適配器放在夾具中間,調(diào)整好位置;
5. 將夾具放在樣品臺(tái)上,定位槽定位,旋緊垂直定位旋鈕,安全鎖歸位;
6. 蓋上機(jī)器的安全門;
7. 設(shè)置振動(dòng)頻率、振動(dòng)時(shí)間;
8. 啟動(dòng)機(jī)器,執(zhí)行破碎過程;
9. 等待機(jī)器完全停止振動(dòng)后關(guān)機(jī),打開安全門,取出樣品;
10. 儀器歸位。
注意事項(xiàng):1. 儀器應(yīng)放置于干燥通風(fēng)的環(huán)境中使用;
2. 樣品對(duì)稱分布于樣品夾中,確保樣品夾平衡;
3. 關(guān)閉安全門前需確認(rèn)夾具已完全固定,無(wú)松動(dòng)現(xiàn)象;
4. 設(shè)置振蕩頻率時(shí)不得超過**量程1800次/min;
5. 對(duì)樣品進(jìn)行冷凍時(shí),應(yīng)注意防止液氮濺出,造成傷害。
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DNA的粗提
1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,中途間隔(輕柔)振蕩三次混勻;
2) 冷卻后加入等體積:易戊醇(24:1),輕柔顛倒混勻使乳化10min;
3) 7000g-8000g離心10min(18-20℃);
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中;
5) (根據(jù)需要可用氯放:易戊醇如上法重復(fù)抽提一次,吸取上清);
6) 加入與上清液等體積
7) 離心法沉淀DNA;
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上,用Tip頭吸干乙醇;
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次;
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,不要過度干燥;
11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
利用高通量組織研磨儀對(duì)要進(jìn)行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于:研磨過程中,不會(huì)對(duì)植物組織造成破壞,可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨,封閉式的樣品管,避免樣品交叉污染。