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發(fā)布時間:2020-12-01 11:55  







                                                            低溫生物菌種的脫水存法

①沙土保存法,能產孢子的細菌、線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內,裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶)相混合,放在安瓿管內于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用干冰使水汽結凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。

③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。






                                                       低溫生物菌種的冰凍是怎樣的?

生物體的新陳代謝是隨著溫度的降低而減緩的。如果低溫在0℃以上,這個減緩過程一般是可逆的,即溫度回升以后,新陳代謝的速度也隨之恢復。但如溫度降至冰點以下時,生物體常因結冰而發(fā)生不可恢復的損傷。因為所有的生物體體液都含有大量的水(一般在80%左右),細胞器也都懸浮于水溶液中,新陳代謝過程都是在水溶液或膜和水溶液的界面上進行的,所以在結冰的過程中,一方面由于水的晶體──冰晶硬度較大,對于生物體內的精細結構會造成機械損傷;另一方面由于水結冰,使細胞內失去了大量可利用的水,造成脫水現(xiàn)象,從而使精細結構發(fā)生破壞。




低溫生物菌種的改良制備

即采用遺傳育種的方法,使菌株(從自然界分離篩選而得的出發(fā)菌株)的遺傳因子 DNA發(fā)生突變、重組,從而從中選出產量高、成品質量好或具有新的培養(yǎng)特性如耐產物抑制、能利用廉價原料以及具有生產新品種能力的優(yōu)良菌種。采用的方法有誘變育種、雜交育種、細胞融合技術和重組DNA技術。誘變育種是利用誘變因子如紫外線、鈷-60、乙烯類等物理或化學誘變劑處理生產菌株的單孢子懸浮液,以獲得誘發(fā)突變株。隨后進行突變株的篩選,從中篩選高產菌株。由于隨機的突變群體中,有益突變所占比例很低,要獲得高產突變株必須進行大量篩選??筛鶕锖铣赏緩街械姆磻c,并通過它們的改變以提高產率或其他特性,如選育抗產物反饋抑制的突變株、增加細胞透性的突變株及營養(yǎng)缺陷型的突變株等。這種"理性篩選法"廣泛應用于氨基酸產生菌的選育。




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