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親和柱——特點(diǎn)介紹
親和柱,相對(duì)于多功能凈化柱特異性強(qiáng),靈敏度較高;多功能凈化柱就相對(duì)使用方便,無需洗脫,比較適合簡單樣品的樣品純化。
親和柱主要特點(diǎn)如下:
? 可用于黃曲霉,嘔吐,付馬,赭曲霉和玉米赤霉烯酮的檢測(cè)
親和柱親和層析的基本原理
親和層析是一種吸附層析,抗原(或)和相應(yīng)的(或抗原)發(fā)生特異性結(jié)合,而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。
所以將抗原(或)固相化后,就可以使存在液相中的相應(yīng)(或抗原)選擇性地結(jié)合在固相載體上,借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開,達(dá)到分離提純的目的。此法具有有效、快速、簡便等優(yōu)點(diǎn)。
親和柱——親和層析的應(yīng)用
抗原和利用抗原、之間高特異的親和力而進(jìn)行分離的方法又稱為親和層析。例如將抗原結(jié)合于親和層析基質(zhì)上,就可以從中分離其對(duì)應(yīng)的。在蛋白質(zhì)工程菌發(fā)酵液中所需蛋白質(zhì)的濃度通常較低,用離子交換、凝膠過濾等方法都難于進(jìn)行分離,而親和層析則是一種非常有效的方法。將所需蛋白質(zhì)作為抗原,經(jīng)動(dòng)物后制備,將與適當(dāng)基質(zhì)偶聯(lián)形成親和吸附劑,就可以對(duì)發(fā)酵液中的所需蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化??乖㈤g親和力一般比較強(qiáng),其解離常數(shù)為108-10?12M,所以洗脫時(shí)是比較困難的,通常需要較強(qiáng)烈的洗脫條件。可以采取適當(dāng)?shù)姆椒ㄈ绺淖兛乖?、種類或使用類似物等來降低二者的親和力,以便于洗脫。
另外金黃色球菌蛋白A(ProteinA)能夠與球蛋白G(IgG)結(jié)合,可以用于分離各種IgG。