解淀粉芽孢桿菌的拮抗作用

培養(yǎng)基組分與發(fā)酵條件如下：蔗糖為0.25%、黃豆粕粉為1.50%、MgCL2為0.01%、MnSO4為0.01%、種齡12.00h、接種量4.00%、裝瓶量100mL/250mL、培養(yǎng)基初始pH8.0、搖床轉(zhuǎn)速200r/min和37℃發(fā)酵培養(yǎng)48.00h。芽孢生成率93.83%，相應(yīng)的細菌數(shù)為2.28×108cfu/mL。采用人工誘變液體深層發(fā)酵技術(shù)共同開發(fā)解淀粉芽孢桿菌濃縮菌粉，具有菌含量高、活性高、穩(wěn)定性強等特點，施用后抗病增產(chǎn)效果顯著，可制備符合國家標(biāo)準的生物菌劑、生物有機肥、復(fù)合微生物肥等各種肥料，是各地肥料生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品。

解淀粉芽孢桿菌，屬于芽孢桿菌屬，革蘭氏陽性菌，呈短桿狀。由于它可以產(chǎn)生液化淀粉酶分解淀粉而被命名為解淀粉芽孢桿菌。解淀粉芽孢桿菌在農(nóng)業(yè)植物病害的生物防治研究中，對植物真菌病害病原具有廣泛的拮抗作用。其對如菌、赭曲霉菌、三線鐮刀菌等種儲糧產(chǎn)毒真菌都具有拮抗作用；解淀粉芽孢桿菌作為益生菌的應(yīng)用現(xiàn)狀 解淀粉芽孢桿菌在抑制病原菌方面的應(yīng)用 近年來，不少學(xué)者從不同材料中分離鑒定出對其他致病菌具有拮抗效果的解淀粉芽孢桿菌。對辣椒疫霉、枯萎菌（黃瓜、西瓜、香蕉)、菌(香蕉、芒果、辣椒)等真菌病害病原與植物細菌病害病原水稻紋枯病菌均具有拮抗作用。其次，解淀粉芽孢桿菌對病原細菌也有一定的抑制作用。如對藤黃微球菌、白色、大腸桿菌、銅綠假單孢菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇云金芽孢桿菌等細菌均有不同程度的抑制作用。

線蟲也是解淀粉芽孢桿菌拮抗的作用對象，解淀粉芽孢桿菌菌株對松材線蟲、香蕉穿孔線蟲和水稻干尖線蟲等具有較高的殺線蟲活性。

全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提

菌株的鑒定：對篩選得到的乳酸菌進行16S rDNA序列分析，確定其種屬。將活化好的菌液，進行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16]，然后對基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進行PCR擴增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，擴增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL：10×buffer 5 μL；脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL；上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；所以在當(dāng)前社會背景下，化學(xué)肥料和生物肥料結(jié)合使用是可以提高作物產(chǎn)量又降低其含量的理想途徑。Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；模板DNA 1.5 μL ；ddH2O 37 μL。PCR擴增條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反應(yīng)步驟進行30個循環(huán)。擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度及濃度，將達到測序要求的擴增產(chǎn)物送至上海華大基因進行測序，將測序結(jié)果在美國國立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進行比對，并確定其種屬。

食醋發(fā)酵過程中的風(fēng)味成分分析

食醋發(fā)酵過程中的風(fēng)味成分分析 ①樣品預(yù)處理 先將固相微萃取萃取頭置于氣相色譜儀中進樣口處，于250 ℃條件下充分老化至沒有雜質(zhì)峰。準確量取5 mL檢測醋樣置于15 mL的樣品瓶中，加入固體氯化鈉25 g，蓋上蓋子并將其置于40 ℃恒溫水浴中。由于解淀粉芽孢桿菌能夠分泌多種活性物質(zhì)，對果蔬表面的病菌有廣泛的抗性，能夠解決果蔬保鮮和長期儲存問題。將SPME萃取頭插入到樣品瓶的頂空部分，對樣品中的香氣成分吸附富集40 min后將SPME萃取頭從樣品瓶中拔出，插入到GC-MS的氣相色譜進樣口中，推出纖維頭，并于250 ℃條件下解吸2 min，準備樣品檢測和分析。

解淀粉芽孢桿菌F1株拮抗的適宜培養(yǎng)條件

在畜產(chǎn)品加工領(lǐng)域的應(yīng)用

單核細胞增生李斯特菌作為一種常見的食源性致病菌，其引起的李斯特菌病由于高致死率而被廣泛關(guān)注。Kaewklo等發(fā)現(xiàn)，解淀粉芽孢桿菌SP-1-13LM株產(chǎn)生的一種新細菌素amysin具有抗李斯特菌的作用，純化的amysin可抑制產(chǎn)單核細胞李斯特菌、沙門菌和志賀菌。100℃條件下amysin的活性可保持60 min，在pH為3～9的條件下均有活性，但是在蛋白酶κ、α-胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶作用下活性會消失，說明其為天然的蛋白質(zhì)，SDS-PAGE分析純化的分子量為5.2 ku。Zhou等用甘薯淀粉廢水發(fā)酵生產(chǎn)解淀粉芽孢桿菌作為生物化肥，證明對茶樹有促進生長的作用。其抗李斯特菌的活性在4℃保存的片狀香腸中也被觀察到，推測可作為一種安全的生物防腐劑。

饒勝其等研究表明，解淀粉芽孢桿菌F1株拮抗的適宜培養(yǎng)條件為初始pH 5.5、32cC培養(yǎng)48 h；Kaewklom等從解淀粉芽孢桿菌SP-1-13LM菌株的發(fā)酵液中分離純化得到一種新型的細菌素PPB，具有廣譜抑菌活性，能強烈抑制沙門菌、李斯特菌和志賀菌生長。添加0.4％蔗糖、0.2％檸檬酸銨、0.02％KNO3的營養(yǎng)肉湯發(fā)酵上清液對的抑菌率為75.2％；研究還發(fā)現(xiàn)，該上清超濾液(30～100 ku)能抑制的孢子萌發(fā)、延緩菌絲發(fā)育，質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL的蛋白能完全抑制的產(chǎn)生。

此外，解淀粉芽孢桿菌產(chǎn)生的凝乳酶還可以用于奶酪的加工中，且有助于蛋白水解率的提高，縮短成熟期。