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膠凍樣類芽孢桿菌的檢測(cè)方法
膠凍樣類芽孢桿菌作為微生物肥料產(chǎn)品中的重要功能菌,如何準(zhǔn)確快速鑒別對(duì)優(yōu)良菌株篩選和產(chǎn)品檢測(cè)至關(guān)重要。
1、形態(tài)檢測(cè)或者生理生化檢測(cè)
常用的檢測(cè)方法是根據(jù)檢測(cè)的形態(tài)學(xué)或生理生化特征進(jìn)行初步判斷,然而,膠凍樣類芽孢桿菌與土壤類芽孢桿菌(P. edaphicus)是近源菌,兩者具有極其相似的菌體形態(tài)和菌落特征,生理生化性質(zhì)也很相近,因此用傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法很難將兩者分開。
2、DNA測(cè)序檢測(cè)
基于16SrDNA、gyrB基因等保守序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析方法能夠準(zhǔn)確地鑒定膠凍樣類芽孢桿菌,但需要大量測(cè)序,過(guò)程繁瑣且花費(fèi)較高,在大批量菌株的鑒定中并不適用。
3、 PCR檢測(cè)
特異PCR檢測(cè)技術(shù)具有特異性強(qiáng)、敏感度高、快速靈敏的優(yōu)點(diǎn),利用該技術(shù)進(jìn)行膠凍樣類芽孢桿菌的分類鑒定比起其他的檢測(cè)方法更加簡(jiǎn)便省時(shí),并且避免了大量測(cè)序,節(jié)省檢測(cè)成本。
12h膠凍樣類芽孢桿菌的斜面,無(wú)菌操作涂片
方法
(1)取培養(yǎng)12 h膠凍樣類芽孢桿菌的斜面,無(wú)菌操作涂片,經(jīng)革蘭氏染色后觀察其菌體形態(tài);同時(shí)在斜面中加入一定量的無(wú)菌水,涂布于檢測(cè)培養(yǎng)基上,于32 ℃倒置培養(yǎng)36 h,觀察其菌落形態(tài)。
(2)從發(fā)酵終點(diǎn)的膠凍樣類芽孢桿菌發(fā)酵液中吸取5.0 mL于45.0 mL無(wú)菌水中,按1:10進(jìn)行梯度稀釋,每個(gè)樣品取3個(gè)連續(xù)適宜的稀釋度,用0.5 mL無(wú)菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL,均勻地涂布于檢測(cè)培養(yǎng)基平板上;3、PCR檢測(cè)特異PCR檢測(cè)技術(shù)具有特異性強(qiáng)、敏感度高、快速靈敏的優(yōu)點(diǎn),利用該技術(shù)進(jìn)行膠凍樣類芽孢桿菌的分類鑒定比起其他的檢測(cè)方法更加簡(jiǎn)便省時(shí),并且避免了大量測(cè)序,節(jié)省檢測(cè)成本。每一稀釋度重復(fù)3次,同時(shí)以無(wú)菌水作空白對(duì)照,于32 ℃培養(yǎng)48 h,以出現(xiàn)20~300個(gè)菌落數(shù)的稀釋度的平板為計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn),統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)。
主要成分高活性膠凍樣類芽孢桿菌ssww1319及其代謝產(chǎn)物、營(yíng)養(yǎng)性載體。產(chǎn)品特點(diǎn)純,活性高,繁殖快,適應(yīng)性強(qiáng),復(fù)活率高,解磷解鉀,促進(jìn)作物生長(zhǎng),改善作物品質(zhì),刺激作物根系發(fā)育。有
產(chǎn)品功效分解硅酸鹽礦物,溶磷、解鉀、固氮,改善土壤質(zhì)地,提高土壤中磷、鉀含量,促進(jìn)作物對(duì)養(yǎng)分的吸收利用,提升農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)?;罨寥乐泄?、鈣、鎂等中量元素,提高鐵、錳、銅、鋅、鉬、硼等微量元素利用率,提升土壤肥力,預(yù)防植物生理性缺素癥的發(fā)生?;罨寥溃纳仆寥蕾|(zhì)地和微生態(tài)環(huán)境,提高作物抗逆性,預(yù)防或減輕病害。膠凍樣類芽孢桿菌菌粉微生物肥料的作用:膠凍樣類芽孢桿菌菌粉微生物肥料是一種有機(jī)的生物,是繼有機(jī)肥、化肥、微量元素肥之后的又一種新型肥料。