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備型柱子柱壓上升,柱效下降,怎么辦?
對(duì)高的價(jià)值的制備柱來(lái)講,延長(zhǎng)柱子壽命是很重要的。一般要注意保護(hù)柱子,一般來(lái)說(shuō),制備柱子一般需要保護(hù)柱配套。
下面是可能堵塞柱子的原因:
(1)如果您所分離的樣品中雜質(zhì)較多而您在上樣前沒(méi)有經(jīng)過(guò)過(guò)濾(0.45微米),一些顆粒性雜質(zhì)會(huì)積聚在柱頭造成柱壓升高。
(2)也有可能是因?yàn)槟褂玫牧鲃?dòng)向中含有緩沖鹽的原因,結(jié)晶或發(fā)生化學(xué)變化而堵塞??梢园阎記_一沖。
(3)流動(dòng)相是否符合液相色譜的要求?是否過(guò)濾處理?
同一種填料的分析柱、制備柱按線形放大公式套,分離度會(huì)不會(huì)變化?
一般會(huì)有一定的變化,原因有以下幾點(diǎn):
(1)制備柱的裝填是否均勻,如不均勻則可能產(chǎn)生渦流擴(kuò)散使各個(gè)組分的經(jīng)過(guò)通道的直徑不同、阻力不一樣,停留時(shí)間不同,色譜峰可能變寬。
(2)如果樣品在流動(dòng)相中溶解度小,在制備色譜上會(huì)有不同的峰展寬。
(3)如果樣品在分析柱上有展寬或拖尾的現(xiàn)象,放大到制備柱上后峰的展寬和拖尾經(jīng)常會(huì)非常嚴(yán)重,導(dǎo)致分離失敗。
制備色譜
制備色譜是以分離出純物質(zhì)為目的的色譜系統(tǒng),分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng),基于他們目的的不同,制備色譜相對(duì)于分析色譜有很多不同特征,不能簡(jiǎn)單等同。
當(dāng)我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室中想得到納克乃至毫克級(jí)的純物質(zhì)時(shí),稍微改裝下分析型色譜系統(tǒng)就能簡(jiǎn)單輕松的完成,不過(guò),若所需制備的純品量很大,此時(shí),再用分析型色譜系統(tǒng)分離純化,可以預(yù)見(jiàn)這將是一場(chǎng)“災(zāi)難”。
制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應(yīng)對(duì)不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時(shí)盡可能減少成本。