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什么是制備液相色譜儀?
制備液相色譜儀通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜,而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對產(chǎn)品的單體進(jìn)行提取和純化。與傳統(tǒng)的純化方法(如蒸餾、萃?。┍容^,制備液相是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和制藥等領(lǐng)域?qū)Ω呒兌冉M份的需求不斷增加,制備型液相色譜儀應(yīng)用的領(lǐng)域也在迅速的擴(kuò)大發(fā)展。
液相色譜工作原理
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運(yùn)動時(shí), 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時(shí), 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
制備液相色譜的作用
由于液相色譜儀的溶質(zhì)分子在流動相、靜態(tài)流動相和固定相中的傳質(zhì)過程而導(dǎo)致的峰展寬。溶質(zhì)分子在流動相和固定相中的擴(kuò)散、分配、轉(zhuǎn)移的過程并不是瞬間達(dá)到平衡,實(shí)際傳質(zhì)速度是有限的,這一時(shí)間上的滯后使色譜柱總是在非平衡狀態(tài)下工作,從而產(chǎn)生峰展寬.液相色譜儀的靈敏度高,分析速度快,操作方便等優(yōu)點(diǎn),但是受技術(shù)條件的限制,沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)行分析。而液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要?dú)饣?因此不受試樣揮發(fā)性的限制。
使用外力使含有樣品的流動相通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面.當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著液相色譜儀中流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。
液相色譜儀應(yīng)用范圍
它的應(yīng)用范圍比較大,而且有不斷拓展的趨勢。制備純化樣品是它的基礎(chǔ)功能,通過色譜分離,樣品中目標(biāo)物質(zhì)被分離出來有待進(jìn)一步研究,比如分離水樣中有機(jī)物、食品中以備分析等。然后是天然成分研究,有助于中藥學(xué)的發(fā)展。分析前人留下的珍貴藥典,通過藥性研究造福人類。提高產(chǎn)品質(zhì)量,以提高它的價(jià)值和效用,比如純化藥品、純化蛋白質(zhì)制品等。還有一個(gè)方向是用于產(chǎn)品合成的研究,通過獲得一些純度較高的化合物將以促進(jìn)合成實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。