什么是液相色譜？

液相色譜（liquid chromatography，LC）是一種色譜技術(shù)，用于分離和分析溶液中混合物的化學(xué)成分，以確定是否存在或不存在特定成分，如果存在，則存在多少。我們中的許多人會(huì)從上學(xué)開(kāi)始就熟悉平面LC的形式，在濾紙上打上黑色墨水標(biāo)記，將一端浸入水中，然后觀察墨水中的成分顏色是否分開(kāi)。但是，分析應(yīng)用中使用的大多數(shù)LC均基于柱色譜法，這將是本文的重點(diǎn)。顧名思義，液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是使用高色譜分辨率進(jìn)行分離的高的性能分析。分離的組分也可以在檢測(cè)后使用餾分收集器分離，作為純化的手段。HPLC有多種不同的配置，可用于分離分子量從半揮發(fā)性小分子到幾萬(wàn)千道爾頓的大蛋白生物分子的溶解組分。液相色譜法是一種非常流行的分析技術(shù)，廣泛用于環(huán)境監(jiān)控，農(nóng)業(yè)領(lǐng)域。

液相色譜

液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過(guò)程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名，如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。經(jīng)典液相色譜的流動(dòng)相是依靠重力緩慢地流過(guò)色譜柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分離后的樣品是被分級(jí)收集后再進(jìn)行分析的，使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較復(fù)雜。

液相色譜不是堵就是漏，原因很簡(jiǎn)單！

使用液相色譜儀的小伙伴肯定會(huì)遇到漏氣和漏液的狀況，流動(dòng)相是造成液相色譜各種問(wèn)題的主要源頭。液相色譜常見(jiàn)的故障一是堵，二是漏。今天就這兩部分別展開(kāi)討論 。首先，為何會(huì)堵?“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來(lái)源就是細(xì)菌。