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實驗室級別的制備液相色譜主要用于以下領(lǐng)域
1.天然藥品化學、中藥化學。這是國內(nèi)目前廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個搞天然藥化的實驗室都至少有一臺液相,土豪實驗室人手一臺液相。
2.蛋白純化。相對于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點,但是發(fā)展很迅速。同時,由于外國儀器廠家在這個領(lǐng)域的優(yōu)勢不算太大,目前國內(nèi)也在這個領(lǐng)域加快發(fā)展,搶占地盤。
3.藥品雜質(zhì)純化。由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率,往往伴有副產(chǎn)品,如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量,這就得靠液相色譜。
4.手性化合物的制備。這個主要是有機合成和方法學的在用。
液相色譜的應用
(1)分離混合物液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過與試樣預處理技術(shù)相配合,液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。
(2)生化分析由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、藥的研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問題有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
液相色譜儀分類方法
1、按分離目的可分:實驗室液相色譜儀和工業(yè)液相色譜儀。
2、按固定相物理狀態(tài)可分:液液色譜儀和液固色譜儀。
3、按色譜柱形狀可分:填充柱液相色譜儀和平板液相色譜儀。
4、按分離原理可分:吸附液相色譜儀、分配液相色譜儀、離子交換液相色譜儀和凝膠液相色譜儀。
注:①吸附色譜:利用固體吸附表面對不同組分物理吸附性能的差異達到分離的色譜。②分配色譜:利用不同的組分在兩相中有不同的分配系數(shù)以達到分離的色譜。③離子交換色譜:利用離子交換原理的達到分離的色譜。