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怎樣選擇適合你實驗需要的抗體?
(1)確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。
(2)確定你的實驗類型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經(jīng)驗證過適用于何種實驗的類型,如果抗體說明書沒有提及的應用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種實驗驗證,請根據(jù)說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的抗體。
(3)確定實驗樣本的種屬,Human,Mouse,還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過適用于何種物種實驗,請根據(jù)說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗的抗體。
抗體保存注意事項:大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2 周的時間,所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸!特殊抗體的保存條件:1. 酶聯(lián)抗體:永遠保存在4 度,避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失。2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
細胞培養(yǎng)在實驗過程中污染的原因:
1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感ran細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。
2、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感ran,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體gan染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢凋亡。