培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁的原因可能如下：
1.支原體污染.
2.培養(yǎng)瓶瓶底不干凈.
3.培養(yǎng)液pH 值過堿（NaHCO3 分解）.
4.消化液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過期儲存、儲存不當(dāng).
5.細(xì)胞老化（如傳代前細(xì)胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性）.
6.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高.
建議解決方法：
1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度.
2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體.清潔支架和培養(yǎng)箱.如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物.
3.注意刷洗,或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶.
4.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH 值或充入無菌CO2（將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可）.
5.重新配置消化液或培養(yǎng)液.
6.啟用新的保種細(xì)胞.

7.調(diào)節(jié)**接種細(xì)胞濃度.