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蛋白質(zhì)結(jié)晶方法
液-液擴(kuò)散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中,蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個(gè)有小孔的毛細(xì)管中,一個(gè)測熔點(diǎn)用的毛細(xì)管一般即可(如圖1.2)。下層是密度大的溶液,例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑,它會在上層。以1:1混合,沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液(各自約5μl)通過針頭導(dǎo)入毛細(xì)管,先導(dǎo)入下層的。通過一個(gè)簡易的搖擺式離心機(jī)去除氣泡。再加入上層,進(jìn)而兩層之間形成一個(gè)明顯的界面,它們會逐漸彼此擴(kuò)散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno(1994)已經(jīng)發(fā)展液-液擴(kuò)散技術(shù)至法。蛋白質(zhì)溶液通過毛細(xì)力被吸入狹窄的管中,管的一端是封閉的。接著,開放端入置于小容器的凝膠中,凝膠使得管豎直,蛋白質(zhì)溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上,整個(gè)裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發(fā)。沉淀劑通過凝膠和毛細(xì)管的擴(kuò)散時(shí)間可以由毛細(xì)管插入凝膠的深度控制,從而蛋白質(zhì)溶液中即可形成過飽和區(qū)域,毛細(xì)管底部高而頂部低。這也可作為一個(gè)篩選佳結(jié)晶條件的額外信息。
一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板
實(shí)用新型公開了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板,包括頂部結(jié)晶板和下端結(jié)晶板,所述頂部結(jié)晶板安裝固定在下端結(jié)晶板的上端位置上,所述頂部結(jié)晶板的上端中間設(shè)置有陣列凹槽,通過結(jié)晶板外殼,內(nèi)部儲槽和滴液凹槽所組成的三孔結(jié)晶板可以很好的滿足特定的使用需要,三孔結(jié)晶板的結(jié)晶板外殼連接在頂部結(jié)晶板上,從而可以很好的固定連接住,使得在使用的時(shí)候不會發(fā)生脫落,而結(jié)晶板外殼右上角的內(nèi)部儲槽可以很好的儲存物體,而內(nèi)部儲槽外側(cè)的滴液凹槽排列順序符合大多數(shù)生物方面機(jī)械手蛋白質(zhì)結(jié)晶板的使用需求,并且滴液凹槽工設(shè)置有三個(gè),使得在使用的時(shí)候可以很好的符合生物機(jī)械手的使用,使得滿足特定的使用需求.
蛋白質(zhì)晶體板技術(shù)研究
隨著人類基因組計(jì)劃的完成,近年來生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能研究成為生命科學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn).晶體學(xué)作為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的基礎(chǔ),培養(yǎng)出高質(zhì)量的單晶,對于蛋白質(zhì),核酸等生物大分子三維空間結(jié)構(gòu)的測定是至關(guān)重要的.文章分析和總結(jié)了蛋白質(zhì)結(jié)晶的原理,常用的結(jié)晶化方法以及促進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)晶化技術(shù)研究的新進(jìn)展,蛋白質(zhì)的分離純化的各種原理和方法作了簡要的概述,同時(shí)簡單的介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及影響因素。