蛋白結(jié)晶板方法

本發(fā)明涉及一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板,包括結(jié)晶板主體部分,以及在結(jié)晶板主體上以陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元,每一所述儲(chǔ)槽單元具有一面板,在所述一面板中間位置形成一凹槽,所述凹槽底部為第二面板，在所述第二面板中間位置或靠近一側(cè)的位置凹入形成一儲(chǔ)槽,所述一儲(chǔ)槽至少一側(cè)的第二面形成有至少一個(gè)滴液槽,所述一面板與第二面板通過(guò)連接部連接,所述結(jié)晶板主體部分在其四周具有支撐部.本發(fā)明還涉及一種利用上述結(jié)晶板進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法。

蛋白質(zhì)晶體板是什么

蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)，對(duì)蛋白質(zhì)晶體用X射線(xiàn)衍射法解出蛋白質(zhì)分子中各原子排列的三維結(jié)構(gòu)。在晶體中各蛋白質(zhì)分子以有序的晶胞形式重復(fù)排列，其形成受蛋白質(zhì)的純度和濃度、pH值、溫度、沉淀劑等影響。由于遺傳工程、同步輻射裝置、探測(cè)和分析技術(shù)、結(jié)晶自動(dòng)化等技術(shù)的飛躍進(jìn)步，已獲得的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)從“蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)”中僅有的7個(gè)增加到。為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的主要研究對(duì)象，對(duì)了解生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的各種生物學(xué)功能、外界各種因子對(duì)細(xì)胞的作用、分子設(shè)計(jì)等方面提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

蛋白質(zhì)結(jié)晶板

實(shí)用新型涉及一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板,包括結(jié)晶板主體部分(10),以及在結(jié)晶板主體上以陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元(20),每一所述儲(chǔ)槽單元(20)具有面板(240),在所述面板中間位置形成一凹槽,所述凹槽底部為第二面板(250),在所述第二面板中間位置或靠近一側(cè)的位置凹入形成儲(chǔ)槽(220),所述儲(chǔ)槽(220)至少一側(cè)的第二面板(250)中形成有至少一個(gè)滴液槽(230),所述面板(240)與第二面板(250)通過(guò)連接部(260)連接,所述結(jié)晶板主體部分(10)在其四周具有支撐部(300)。

設(shè)計(jì)并制作了一種在微腔中對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行微批量法(microbatch)結(jié)晶的碟式微流控結(jié)晶芯片,它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級(jí))、操作簡(jiǎn)便的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選方法,這種芯片能成功地結(jié)晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統(tǒng)地比較這種微流控芯片與傳統(tǒng)的使用蒸汽擴(kuò)散法的24孔結(jié)晶板的結(jié)晶能力,用3個(gè)Hampton結(jié)晶試劑盒

蛋白結(jié)晶板

盡管近些年來(lái)在蛋白質(zhì)結(jié)晶的理論、方法和技術(shù)上已取得巨大發(fā)展,獲得衍射良好的蛋白質(zhì)晶體仍然是利用X-射線(xiàn)解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一個(gè)主要瓶頸問(wèn)題。這里我們發(fā)展了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法—固液界面方法,即SLIM。該方法主要包括兩個(gè)部分1)預(yù)先加入并干燥蛋白質(zhì)母液;2)進(jìn)行晶體生長(zhǎng)的時(shí)候,直接將蛋白質(zhì)溶液加入'干母液'中,從而產(chǎn)生一個(gè)固體(干母液)和液體(蛋白質(zhì)溶液)的界面。該方法不僅操作簡(jiǎn)單、快速,而且降低了對(duì)蛋白質(zhì)溶液濃度的要求。