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細(xì)胞為何總是喜歡抱團(tuán)?1,細(xì)胞死釋放出DNA,纏繞其他細(xì)胞,形成黏性的細(xì)胞團(tuán)(消化的過程可能過于粗暴,吹打太用力,消化太久,消化液太強(qiáng)或有毒性等)。2,細(xì)胞離心速度過大或時(shí)間太長(zhǎng)。3,消化不完全的時(shí)候,細(xì)胞和細(xì)胞之間的連接沒有分開;消化過度的時(shí)候,圓形的細(xì)胞容易聚堆,再分開很困難!4,狀態(tài)不好、老化的細(xì)胞,也可能會(huì)出現(xiàn)抱團(tuán)生長(zhǎng)的情況(比如換液不及時(shí)、長(zhǎng)的太滿才傳代、污染等造成的細(xì)胞狀態(tài))。5,傳代后細(xì)胞鋪板不均勻。
細(xì)胞抱團(tuán)了,要如何處理?1,如果細(xì)胞抱團(tuán)不影響生長(zhǎng)就沒問題,只是計(jì)數(shù)的時(shí)候要麻煩點(diǎn)了。在消化的時(shí)候在細(xì)胞由多角形變成圓型之前,就用手輕磕培養(yǎng)瓶的側(cè)壁,使細(xì)胞從壁上脫落,就可以了!——不要吹打,對(duì)細(xì)胞性狀和生長(zhǎng)都不好。2,如果感覺有死細(xì)胞的DNA,在細(xì)胞懸液中加入幾滴無菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細(xì)胞,防止對(duì)細(xì)胞膜造成物理?yè)p傷。
免yi活性tai、神經(jīng)活性tai、其他活性tai等。其他活性tai包括:膽固醇tai、促進(jìn)礦物質(zhì)吸收的肽(CPPS)、酶調(diào)節(jié)劑(如促胰酶肽)、ji素肽如生長(zhǎng)ji素釋放因子(GRFS)、白蛋白胰島素增效肽、kang菌多肽(如乳酸鏈球菌素、橡膠素)、kang癌多肽等。生物提取的多肽具有很強(qiáng)的活性,所以叫做活性tai!只有活性的肽才能對(duì)人體產(chǎn)生很好的效果!但是人工合成的多肽有很多是沒有活性的,是需要篩選的,只有活性tai才能被人體安全使用!
提高多肽穩(wěn)定性的途徑:(1)定點(diǎn)突變 :通過基因工程手段替換引起多肽不穩(wěn)定的殘基或引入能增加多肽穩(wěn)定性的殘基,可提高多肽的穩(wěn)定性。(2)化學(xué)修飾:多肽的化學(xué)修飾方法很多,研究多的是PEG修飾。PEG是一種水溶性高分子化合物,在體內(nèi)可降解,無毒。PEG與多肽結(jié)合后能提高熱穩(wěn)定性,抵抗蛋白酶的降解,降低抗原性,延長(zhǎng)體內(nèi)半衰期。選擇合適的修飾方法和控制修飾程度可體質(zhì)或提高原生物活性。