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等溫核酸試劑盒
RPA不受場(chǎng)地的限制,不需要昂貴儀器,對(duì)溫度要求低,恒溫?cái)U(kuò)增,時(shí)間短,可以在資源匱乏地區(qū)實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的,目前已廣泛用于食品安全及動(dòng)物疫病檢測(cè),但國內(nèi)就PRA技術(shù)在禽病病原檢測(cè)中的研究并不多。未來RPA技術(shù)可能在以下方面進(jìn)一步突破:①研發(fā)專門引物設(shè)計(jì)軟件,降低引物設(shè)計(jì)難度。②反應(yīng)溫度范圍拓寬,不局限于某一溫度,可在某溫度范圍內(nèi)完成擴(kuò)增反應(yīng)。③實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè),結(jié)果判定更簡(jiǎn)便直觀。④可擴(kuò)增長片段核酸。⑤研發(fā)出低廉的酶制劑,降低成本。相信隨著技術(shù)不斷進(jìn)步,勢(shì)會(huì)引起一場(chǎng)核酸檢測(cè)的革命,取代PCR技術(shù)在分子檢測(cè)中的霸主地位,在禽病病原的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中發(fā)揮更大的作用。
核酸試劑盒
核酸檢測(cè),是通過檢測(cè)病毒的遺傳物質(zhì)核酸而做出診斷,采用RNA逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)和PCR技術(shù),簡(jiǎn)單說就是使用生物技術(shù)抓取病毒獨(dú)有的核酸基因片段,然后大量復(fù)印,把它們的特點(diǎn)無限放大,這樣就可以輕松檢測(cè)到病毒了。核酸檢測(cè)試劑盒的設(shè)計(jì)本身就是針對(duì)新型冠狀病毒特有的基因片段,并且還做了特異性驗(yàn)證,用試劑盒去檢測(cè)其他相似的病毒如SARS等,檢測(cè)結(jié)果均是陰性,只有檢測(cè)病毒時(shí)才是陽性,這就確保了試劑盒的特異性,從而不會(huì)誤診。
RPA反應(yīng)的適宜溫度在37℃~42℃之間,無需變性,常溫下即可反應(yīng),大大加快了PCR的速度。并且由于不需要溫控設(shè)備,RPA可以真正實(shí)現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測(cè)。RPA檢測(cè)的靈敏度很高,能夠?qū)⒑哿康暮怂?/span>(尤其是DNA)模板擴(kuò)增到可檢出水平,從單個(gè)模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。無需復(fù)雜樣品處理,即可實(shí)地檢測(cè);既可擴(kuò)增DNA也可擴(kuò)增RNA,省去額外的cDNA合成步驟;檢測(cè)方式多樣:終點(diǎn)檢測(cè)、對(duì)擴(kuò)增過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控或通過側(cè)流層析試紙條(LFD)讀取結(jié)果。
試劑盒包括兩類:①.TwistAmp凍干研發(fā)試劑盒(包括TwistAmp Basic試劑盒、TwistAmp exo 試劑盒和TwistAmp nfo 試劑盒共三種);②. TwistAmp液態(tài)研發(fā)試劑盒(包括TwistAmp Liquid Basic 試劑盒和TwistAmp Liquid exo 試劑盒共兩種)
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