廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。資料顯示：在正常條件下，填料粒度＞20μm時(shí)，干法填充制備柱較為合適。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。

液相色譜柱的使用方法

關(guān)于色譜柱的安裝、維護(hù)、保存以及由色譜柱導(dǎo)致的這樣那樣的色譜故障也是一門學(xué)問。gao效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過濾流動(dòng)相和樣品，凈化樣品，避免過高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時(shí)的沖洗等。

1.加裝保護(hù)柱

保護(hù)柱的作用是過濾掉來自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。答：新柱活化，實(shí)際上是一個(gè)平衡的過程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽，尤其重要。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、zhong成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護(hù)分析柱必不可少的措施。

保護(hù)柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析(50～100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時(shí),應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。

2.過濾流動(dòng)相和樣品

流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有ji溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過色譜柱的流動(dòng)相均應(yīng)過濾,但在實(shí)際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別:當(dāng)有ji溶劑用色譜純級(jí),水用石英亞沸水或其它超純水時(shí),在能確保水和有ji溶劑的質(zhì)量且沒有受到污染時(shí),過濾并無更多實(shí)際意義。而樣品的易吸附機(jī)制也可能會(huì)和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。

當(dāng)流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),則過濾是必要的,如前所述,當(dāng)緩沖溶液放置一段時(shí)間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過48 h,冬季一般不超過一周)后,在使用前還應(yīng)重新過濾。

所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0. 45μm ( 0. 22μm則更好)孔徑濾膜過濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。

裝流動(dòng)相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過載而起不到過濾作用。

3.凈化樣品

當(dāng)樣品中含有對(duì)色譜柱有損害的化學(xué)成分,如產(chǎn)生yong久性吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機(jī)分子和強(qiáng)吸附性物質(zhì),以及可能對(duì)柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團(tuán)離子。在進(jìn)樣前應(yīng)盡可能對(duì)樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

4.避免過高柱壓

雖然gao效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000 p si (磅/平方英寸) ,但過高及過大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命,避免的方法是

(1)柱壓過高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過柱z大允許壓力的一半為宜。

( 2)當(dāng)流速較大時(shí),應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。

(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。

5.注意溫度和酸堿度

一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱z高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動(dòng)相pH接近使用限度時(shí),更應(yīng)降低使用溫度。

溫度過高會(huì)加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

正確及時(shí)的沖洗

開始試驗(yàn)前,應(yīng)了解柱中當(dāng)前是何種溶劑。對(duì)于新色譜柱,如無特殊說明均為評(píng)價(jià)報(bào)告中所用流動(dòng)相。柱中當(dāng)前溶劑一定要與分析樣品所用流動(dòng)相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。

Kinetex液相色譜柱- HPLC 和 UHPLC 的核-殼優(yōu)勢

充分發(fā)揮 UHPLC 系統(tǒng)的性能

與市面上傳統(tǒng)的亞 2 μm 級(jí)色譜柱相比，Kinetex 1.3 和1.7 μm 核-殼色譜柱具有更高的柱效，可以實(shí)現(xiàn)出色的色譜分離度、更高的峰容量和更大的靈敏度，讓您可以從每

次 UHPLC 分析中獲得盡可能多的信息。

保護(hù)色譜柱而性能不下降

將污染物和微粒捕集在 SecurityGuard? ULTRA 保護(hù)柱系統(tǒng)中。

HPLC 和 UHPLC 的升級(jí)

在小流量 HPLC 或 UHPLC 系統(tǒng)上，Kinetex 2.6 μm 色譜柱的表現(xiàn)與全多孔亞 2 μm 級(jí)色譜柱相當(dāng)，柱效是 5 μm 填料的 3 倍、3 μm 全多孔填料的 2 倍。使用更短的 Kinetex色譜柱顯著提升現(xiàn)有方法的生產(chǎn)率和性能，同時(shí)減少溶劑消耗！

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營：Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的化學(xué)試劑、玻璃儀器、實(shí)驗(yàn)器材和生物耗材，是全方面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。LuxAMP手性液相色譜柱對(duì)尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺對(duì)映體進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的手性分離Lux3μmAMP是一款專為ben丙胺和取代ben丙胺（包括jia基ben丙胺）的手性分析而開發(fā)和測試的獨(dú)特液相色譜填料。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。創(chuàng)業(yè)的路上我們風(fēng)雨同舟，一份耕耘就有一份收獲

常見液相色譜柱性能比較。

常用的'w能柱'填料為'C18'，簡稱'ODS'柱，即十八烷jigui烷鍵合硅膠填料(Octadecylsilyl，簡稱ODS)。這種填料在反相色譜中發(fā)揮著極為重要的作用，它可完成gao效液相色譜大多數(shù)的分析任務(wù)。7μm色譜柱高20%在HPLC和UHPLC系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)亞2μm級(jí)性能立即改善您需要3。由于C18(ODS)是長鏈烷ji鍵合相，有較高的碳含量和更好的疏水性，對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力

反相色譜是迄今在gao效液相色譜中應(yīng)用廣泛的技術(shù)，主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的機(jī)制也能以同樣的保留方式分離。色譜柱的流向不能改變?cè)谖覀兂Ｒ?guī)思維中，色譜柱上標(biāo)示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。

按鍵合到基質(zhì)上的官能團(tuán)可分為:

反相柱:填料是非極性的，官能團(tuán)為烷烴。推薦色譜柱——賽分GP-C18色譜柱

正相柱:填料是極性的，官能團(tuán)為,CNqing基、,NH2氨基等。推薦色譜柱——賽分正相色譜柱HP-Amino，

賽分正相色譜柱HP-Cyano等等：

離子交換鍵合相:陽離子官能團(tuán):,推薦色譜柱——HP-SCX強(qiáng)陽離子交換色譜柱

陰離子官能團(tuán):―R4N，季銨基、-氨基等。推薦色譜柱——HP-SAX強(qiáng)陰離子交換色譜柱

( 由于硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在pH,2,7.5的范圍內(nèi)使用，而離子交換色譜要求有更寬的pH范圍，因此其基質(zhì)現(xiàn)在仍主要使用聚ben乙烯和二乙烯ben。

) 流動(dòng)相:反相色譜常用的流動(dòng)相及其沖洗強(qiáng)度如下: H2O,jia醇yi腈,乙醇,bing醇,異bing醇,si氫fu喃 常用的流動(dòng)相組成是:jia醇-H2O'和'yi腈-H2O'，由于yi腈的ju毒性，通常優(yōu)先考慮'jia醇-H2O'流動(dòng)相。 反相色譜中，溶質(zhì)按其疏水性大小進(jìn)行分離，極性越大疏水性越小的溶質(zhì)，越不易與非極性的固定相結(jié)合，所以先被洗脫下來。保護(hù)色譜柱而性能不下降將污染物和微粒捕集在SecurityGuard。

流動(dòng)相的pH對(duì)樣品溶質(zhì)的電離狀態(tài)影響很大，進(jìn)而影響其疏水性，所以在分離肽類和蛋白質(zhì)等生物大分子的過程中，經(jīng)常要加入修飾性的離子對(duì)物質(zhì)，常用的離子對(duì)試劑是三fuyi酸(TFA)，使用濃度為0.1,，使流動(dòng)相的pH值為2,3，這樣可以有效地抑制氨基酸上α羧基的離介，使其疏水性增加，延長洗脫時(shí)間，提高分辨率和分離效果。gao效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過濾流動(dòng)相和樣品，凈化樣品，避免過高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時(shí)的沖洗等。

完全離子化的溶質(zhì)，例如強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其在反相鍵合相上的保留值很低，近于死時(shí)間流出，不能進(jìn)行分析。根據(jù)離子對(duì)色譜的原理將一種與樣品離子電荷(A，)相反的離子(B,)，稱為對(duì)離子，加入到流動(dòng)相中，使其與樣品離子結(jié)合生成弱極性的離子對(duì)，即中性締合物，從而增強(qiáng)了樣品的疏水性，加大了保留值，改善了分離效果。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。

      LuxAMP 手性液相色譜柱

色譜柱： Lux 3 μm AMP

規(guī)格： 150 x 3.0mm

貨號(hào)： 00F-4751-Y0

流動(dòng)相： A：5mM 碳酸氫銨，使用氨

水調(diào)整為 pH 11

B：jia醇

流速： 0.42mL/min

溫度： 室溫

檢測： MS/MS (SCIEX 4500 QTRAP)

1. 1S,2R( )-ma黃堿

2. R,R(-)-偽ma黃堿

3. S,S( )-偽ma黃堿

4. 1R,2S(-)-ma黃堿

5. R(-)-ben丙胺

6. R(-)-jia基ben丙胺

7. S( )-ben丙胺

8. S( )-jia基ben丙胺

9. ben丁胺

10. 亞jia基二氧基jia基ben丙胺

11. 亞jia基二氧基jia基ben丙胺

包含在此干擾物研究中但未采用色譜

圖顯示的化合物：

對(duì)乙酰氨基酚

阿斯匹林

(±)-氯ben那敏

ka啡因

ben海拉明

右美沙芬

布

(±)-MDA

(±)-MDEA

去氧s上腺素

去jiama黃堿

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學(xué)，歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念，自強(qiáng)不息、開拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購平臺(tái)，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強(qiáng)弱的組份z先被沖洗出色譜柱?？茖W(xué)化、精細(xì)化、專業(yè)化。想了解：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等信息，可聯(lián)系廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司

GeminipH 靈活性強(qiáng)的液相色譜柱

飲用水中的ji素：

EPA 方法 539

色譜柱： Gemini 3 μm NX-C18

規(guī)格： 100 x 2.0mm

貨號(hào)： 00D-4453-B0

流動(dòng)相： A：0.2% NH4

OH 的水溶液

B：0.2% NH4

OH 的jia醇溶液

流速： 0.2mL/min

溫度： 22 C

檢測： 串聯(lián)質(zhì)譜儀 (MS/MS) (22 C)

檢測器： SCIEX API 4000 系統(tǒng)

樣品： 1. 雌三醇 8. 炔雌醇-d4

2. 雌三醇-d2 (IS) 9. 17-α-炔雌醇

3. 雙酚 A-d16 10. 13C2-炔雌醇 (IS)

4. 馬烯雌酮 11. 雄烯er酮

5. 雌酮 12. gao酮-d3

6. β-雌二醇 13. gao酮

7. 13C6-雌二醇 (IS)

手性色譜柱正反相體系轉(zhuǎn)換步驟

纖維素或直鏈淀粉類手性柱在正相體系中的應(yīng)用居多，使用后一般在正相體系里保存。但是，這類手性柱在反相體系中也可以使用，需要按下面步驟小心轉(zhuǎn)換：

從正相轉(zhuǎn)向反向模式，步驟如下：

步：純異bing醇在0.2mL/min下流出30ml，把柱子里的正相溶劑置換出來。

第二步：純jia醇在0.5mL/min下流出30ml，把柱子里的異bing醇置換出來。

第三步：jia醇/水在0.5mL/min下流出30mL，或者平衡20分鐘。柱子使用完以后，建議在純jia醇里保存。

從反相轉(zhuǎn)向正相模式，步驟如下：

步：純jia醇在0.5mL/min下流出30ml，把柱子里的水置換出來。

第二步：純異bing醇在0.2mL/min下流出30ml，把柱子里的jia醇置換出來。

第三步：用正己烷/異bing醇在0.5mL/min下流出30mL，或者平衡20分鐘。柱子用完以后，在正己烷/異bing醇（9：1）里保存。