廣州碩譜生物科技有限公司活性炭固相萃取柱選擇

離子交換固相萃取小柱方法開發(fā)中需要注意的問題。

離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物，其機理是利用帶電荷的目標(biāo)化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質(zhì)可以是極性的，如水溶液，也可以是非極性的有機溶液，但在實際應(yīng)用中以水溶液較多，包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。

常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型

C18柱

C18是目前使用zui多的一種SPE柱，根據(jù)2003年的一項統(tǒng)計，在所有使用

的SPE柱中，C18柱占了56％左右。C18柱的主要官能團是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽離子交換。在所有鍵合硅

膠SPE吸附劑中，C18柱的非極性吸附能力zui強。因此，強非極性化合物被C18

吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強的分子，如碳水化合物( carbohy

-drates).C18一般被當(dāng)作zui沒有選擇性或通用型的吸附劑，因為絕大多數(shù)有機分子或多或少含有非極性基團，C18可以從水溶液中吸附這些有機化合物。因此C18對于同時分離不同結(jié)構(gòu)的化合物時較為適用。由于C18的選擇性較低，其zui終萃取物往往沒有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質(zhì)純化中，C18柱是優(yōu)1秀的除鹽工具，因為樣品中的鹽在C18柱上沒有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多，主要是碳鏈較長的原因。

固相萃取的作用

分離富集將目標(biāo)物從大量的樣品基質(zhì)中分離出來，并除去樣品基質(zhì)，同時將樣品轉(zhuǎn)化為儀器能夠接受的形式之后才能進行儀器分析。固相萃取既適合用于小體積樣品中的目標(biāo)化合物分離及基質(zhì)去除，也適用于對大體積樣品中的微量目標(biāo)化合物富集。

凈化樣品前處理主要目的之一就是要除去樣品中對儀器或分析有干擾的成分或雜質(zhì)。

轉(zhuǎn)換溶劑固相萃取中沒有乳化的問題，沒有發(fā)生有機1溶劑和水相的直接作用

關(guān)于色譜柱的填裝問題！我個人認(rèn)為現(xiàn)在色譜柱的填裝一般有3種情況：1.國外生產(chǎn)填料并填裝完成成品賣到國內(nèi)；2.國外生產(chǎn)填料，國內(nèi)填裝銷售；3.國內(nèi)生產(chǎn)填料，國內(nèi)填裝銷售。一般情況下，1的情況賣的zui貴，也質(zhì)量zui好！可是我就不明白了：如果是填料的生產(chǎn)很復(fù)雜的話，那么填裝上國內(nèi)也跟不上去嗎？為什么換在國內(nèi)填裝就會出現(xiàn)或多或少的一些小問題呢？

答：國內(nèi)填裝會出現(xiàn)質(zhì)量小問題，和國內(nèi)目前普遍做事沒有國外嚴(yán)謹(jǐn)有關(guān)吧。如果工藝技術(shù)上沒有問題，又能制訂并切實執(zhí)行一整套嚴(yán)格的生產(chǎn)質(zhì)量管理措施，國內(nèi)填裝和國外填裝并無區(qū)別。

原來的是柱色譜,也叫柱層析,初始分離葉綠素時，是將碳酸鈣等粉體填入柱子中制成。隨后，薄層色譜被簡化。

化學(xué)鍵合色譜，就固定相而言，碳酸鈣、硅藻土等作固定相雖然經(jīng)典，但應(yīng)用范圍不夠廣。之后，有機分子利用化學(xué)反應(yīng)通過共價鍵與載體(硅膠)表面結(jié)合，形成均勻牢固的單分子薄層，從而形成固定相。分離器的分離機制兼具吸附和分配兩種?？煞蛛x物質(zhì)的范圍擴大了。

固體萃取柱的選用

萃取柱的選擇通常是從兩個方面來考慮的：吸附劑和柱規(guī)格的選擇。合適的吸附填料可使干擾物質(zhì)與目標(biāo)成分很好地分離，滿足回收要求。而且吸附劑能夠吸附的化合物的質(zhì)量是有限的，當(dāng)樣品量太大時，就會出現(xiàn)“過載”，使目標(biāo)物直接“穿透萃取柱而不留。

吸附劑的選擇主要根據(jù)目標(biāo)化合物的性質(zhì)和基質(zhì)的性質(zhì)。

吸附劑的選擇大致可以通過上述兩種方式來選擇，具體例子中，可以根據(jù)“分清目標(biāo)化合物與主要干擾物”的原則來

在選擇了合適的吸附劑后，還要根據(jù)檢定所需的試樣數(shù)量，選擇合適的柱規(guī)格。因為萃取柱中的吸附劑能吸附的化合物的質(zhì)量有限，一旦超出這一數(shù)值，目標(biāo)物就無法有效保留，從而大大降低洗脫效果。因此，根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格，是很有必要的。