酶底物法測定總大腸菌群的影響因素

環(huán)境因素的影響

對同一水樣在自然環(huán)境下與無菌室中分別進行總大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測， 培養(yǎng)時間為 24 h，培養(yǎng)溫度為( 36 ± 1) ℃ ，水樣在自然環(huán)境下與無菌室內(nèi)總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測值相對偏差在 10% 以內(nèi)，樣品T檢驗分析p＞0．05，監(jiān)測值差異不顯著，表明此方法對實驗環(huán)境是否無菌沒有嚴(yán)格的要求。

程控定量封口機操作規(guī)程

1.將電源開關(guān)及機身背后開關(guān)打開，橙黃色指示燈亮，儀器開始加熱。

2.10-30分鐘（時間受環(huán)境溫度及工作條件等因素影響）后，預(yù)熱完成，綠色指示燈亮，儀器達到封口溫度可進行封口操作。

3.把裝有樣品和Colitech試劑的定量盤放置在進樣口。

4.向儀器方向輕輕推送定量盤，儀器感應(yīng)后會自動進樣，帶動其進入封口。

5.整個進樣過程大概持續(xù)15秒。定量盤封口完成后，會從儀器后方送出，從后方拿取定量盤即可。

6.如果有多個定量盤待封口，可進行連續(xù)封口，中間間隔十幾秒種即可。

7.如果遇到類似定量盤未放平就進樣的狀況，可點擊反轉(zhuǎn)按鈕進行儀器反轉(zhuǎn)。如果定量盤已完全進入儀器，則不可進行反轉(zhuǎn)操作。

8.使用完畢后，關(guān)閉儀器電源并拔下電源線。

食品大腸桿菌菌群檢測--MPN計數(shù)法

MPN（most probable number）法：即Z近似數(shù)法，也稱為Z可能數(shù)法，是食品檢驗中常用的方法。1915年，McCrady第yi次發(fā)表了用MPN法 (Z大可能數(shù)法) 來估算細菌濃度的方法， 這是一種應(yīng)用概率理論來估算細菌濃度的方法。

MPN法：利用待測微生物的特殊生理功能的選擇性來擺脫其他微生物類群的干擾，并通過該生理功能的表現(xiàn)來判斷該類群微生物的存在和豐度。因為細菌在樣本內(nèi)的分布是隨機的，所以檢測細菌時，可應(yīng)用概率理論計算菌數(shù)，實驗結(jié)果以MPN值表示，但MPN值并不能表示實際菌落數(shù)， 實際菌落數(shù)有可能落在置信區(qū)間內(nèi)的任何一點，MPN值是落在這個置信區(qū)間內(nèi)概率Z大的一點。

什么是總大腸菌群?

總大腸菌群是指一群在37℃培養(yǎng)24小時和48小時后，能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。它不是某一種或某一屬細菌，而是具有共同特性的一組細菌。

為什么要檢測飲用水中總大腸菌群?

天然水體中含有多種微生物，要判斷水質(zhì)中是否含有病原微生物、需檢測每一種病原微生物，由于種類多和檢測困難的原因，實際工作中很難做到。人和其它溫血動物，如牛、羊、狗等的腸道存在大量的總大腸菌群，如果飲用水受到糞便污染時，容易在水體中檢測到，總大腸菌群的檢測方法也簡單易行;并且總大腸菌群對消毒劑的抵抗力與其他腸道致病菌相似，消滅了總大腸菌群，可以認(rèn)為致病腸道細菌也已消滅。針對病原微生物的一些共同特征，就選取總大腸菌群為病原微生物的指示菌之一，水中總大腸菌群含量的多寡，可在一定程度上反映水質(zhì)受病原微生物污染的狀況，在水質(zhì)衛(wèi)生學(xué)評價時具有重要意義。