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蛋白質(zhì)結(jié)晶原理
蛋白質(zhì)的X射線結(jié)構(gòu)分析首先要獲得合適的單晶。蛋白質(zhì)結(jié)晶學(xué)尚未發(fā)展成熟,盡管很受人親睞,特別是受航天飛機中微重力實驗 的激發(fā)。蛋白質(zhì)結(jié)晶是一個反復(fù)試驗的過程,蛋白質(zhì)逐漸會從溶液中析出,雜質(zhì)、晶核及其他未知因素對此過程有所影響。通常,蛋白質(zhì)越純,生長晶體幾率越大。蛋白質(zhì)結(jié)晶學(xué)者對蛋白質(zhì)的純度要求要嚴(yán)于生化學(xué)家的要求,后者往往在酶催化活性足夠高時就很滿意。另一方面,為了使蛋白質(zhì)結(jié)晶,不僅要加其他成分,所有蛋白質(zhì)分子的表面性質(zhì)也必須是相同的,特別是表面的電荷分布,因為它影響晶體內(nèi)分子的聚集。質(zhì)譜是蛋白質(zhì)結(jié)晶中的一種有效工具,例如檢測重組蛋白的表達(dá)、樣品純度、重原子衍生物及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的特性。
蛋白結(jié)晶板方法
用于人工和高通量蛋白晶體生長以及其他生物或有機晶體生長的設(shè)備和方法.一微孔板包含多個單元格,以及一限定微孔板中單元格的邊框.在每個單元格中至少存在一個上部開口的孔.單元格中的每個孔底部可以封閉,或者其底部是開口的,但孔底部由一獨立部件封閉,其可以為獨立的膜或板(例如塑料,玻璃或金屬)或一模制部件。
蛋白結(jié)晶板使用
主要表現(xiàn)在2個方面:一是在傳統(tǒng)結(jié)晶方法和試劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一系列新的的結(jié)晶技術(shù)和篩選試劑盒;二是從生物學(xué),物理學(xué)和化學(xué)等角度提出的一些提高結(jié)晶篩選效率的新技術(shù),主要包括通過分子工程改造蛋白,提高蛋白溶液的穩(wěn)定和均一性,導(dǎo)入籽晶,共結(jié)晶,改善結(jié)晶界面和變溫篩選等技術(shù).展望了該領(lǐng)域未來的發(fā)展趨勢。