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發(fā)布時(shí)間:2021-08-20 04:51  

意義重大的蛋白質(zhì)結(jié)晶

對(duì)“靜止”的蛋白質(zhì)進(jìn)行觀察,很多“疑難雜癥”都能浮出水面,蛋白質(zhì)晶體對(duì)于生命科學(xué)的研究具有重大意義。以今年年初爆發(fā)的新型冠狀病毒(2019-nCoV)為例,我國科學(xué)家就是利用病毒的水解酶與的復(fù)合物晶體成功解析了原子結(jié)構(gòu),可為抗病毒的快速篩選和研發(fā)提供有力的工具。截止2020年1月1日,蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫收錄了超過16萬個(gè)蛋白質(zhì)晶體的原子結(jié)構(gòu)信息,已經(jīng)滲透到了眾多領(lǐng)域,如藥學(xué),醫(yī)學(xué),農(nóng)業(yè),材料學(xué)等。目前,有9位科學(xué)家因解析蛋白質(zhì)的晶體結(jié)構(gòu)而獲得諾貝爾獎(jiǎng)。然而,讓蛋白質(zhì)結(jié)晶可不是一件容易的事情。在科學(xué)界,蛋白質(zhì)晶體的生長常常被認(rèn)為是“藝術(shù)”遠(yuǎn)多于“科學(xué)”,甚至有許多科學(xué)家為了晶體更好地結(jié)晶,開始有些“小”:比如把做好的結(jié)晶板放在車上開出去幾個(gè)小時(shí),或是在晶體實(shí)驗(yàn)柜門上貼了兩只大恐龍貼紙……其實(shí),這些“小”都反映出:蛋白質(zhì)晶體的結(jié)晶過程受到很多因素的影響,能夠有一顆完整的結(jié)晶是一件很困難的事情。想要獲得足夠質(zhì)量的晶體,尤其對(duì)新穎的、表征不佳的基因產(chǎn)物來說,通常是新結(jié)構(gòu)測定項(xiàng)目中困難也是耗時(shí)的步驟。




蛋白結(jié)晶板使用

在基因組、蛋白質(zhì)組、納米技術(shù)中,結(jié)晶學(xué)是一門關(guān)鍵的科學(xué)。在這些研究領(lǐng)域中,通過X射線進(jìn)行單晶結(jié)構(gòu)分析來探測分子的三維結(jié)構(gòu)是很重要的技術(shù)。其中大分子晶體研究是主要的挑戰(zhàn),GREINER生產(chǎn)一系列的產(chǎn)品來滿足這一應(yīng)用。

有一平臺(tái),平臺(tái)中有一個(gè)方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,

每池容量3.9μl池底透明。

標(biāo)準(zhǔn)形板,方形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計(jì)

有一平臺(tái),平臺(tái)中有三個(gè)方形平底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池

容量4.1μl,池底透明.

標(biāo)準(zhǔn)形板,圓形池:96孔,方形孔,孔容量320μl,孔底磨砂不透明.每一孔中設(shè)計(jì)有一

平臺(tái),平臺(tái)中有三個(gè)圓形U底的結(jié)晶池,用于接收樣品,每池容量



蛋白結(jié)晶板

形核劑的添加使蛋白質(zhì)晶體異相形核,相較于均相形核其需要克服的阻力小,形核勢壘低.因而形核劑的使用對(duì)于難結(jié)晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質(zhì)結(jié)晶具有重要意義.隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,形核劑在蛋白質(zhì)結(jié)晶中的研究仍是結(jié)晶方法學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題.多孔微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)分子的吸附作用有利于無序蛋白質(zhì)分子團(tuán)簇的形成,進(jìn)而促進(jìn)蛋白質(zhì)形核.添加多孔微球不但可以增加結(jié)晶條件篩選數(shù),也可以提高晶體質(zhì)量.促進(jìn)蛋白質(zhì)分子有序排列的形核劑籽晶的使用,使晶體的形核生長過程始終處于結(jié)晶體系溶液濃度較低的狀態(tài),而交聯(lián)的籽晶因?yàn)榉€(wěn)定性更高而更有應(yīng)用前景.新型交互擴(kuò)散結(jié)晶板中。



蛋白質(zhì)晶體板介紹使用

通過紅外光譜,掃描電鏡,X射線衍射對(duì)產(chǎn)物的晶型,形貌及物相進(jìn)行了詳細(xì)表征,初步探討了文石晶體形成機(jī)理及生長機(jī)理。本文研究的主要內(nèi)容及所獲得的結(jié)論如下:1.常溫常壓下,以竹蟶韌帶纖維狀蛋白質(zhì)為基底,采用氣體擴(kuò)散法可以在較大的條件范圍內(nèi)合成出純文石晶體:即稀硫酸濃度0.1mol-L-1,NH4HCO3粉末19.0g,CaCl2濃度0.9-9.0mmol·L-1,溶液高度10-30mm,反應(yīng)溫度20-30℃,結(jié)晶時(shí)間3-12小時(shí)。而空白對(duì)照(以玻璃蓋玻片為基底)制備出的晶體主要為菱形方解石,還有少量文石和球文石。




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