蛋白結(jié)晶板使用

蛋白質(zhì)是水產(chǎn)品的主要組分,其含量測定在水產(chǎn)品加工及研究等方面應(yīng)用極為廣泛.目前,各蛋白含量快速測定方法通常是在試管中進行反應(yīng)并應(yīng)用分光光度計測定,其操作過程較繁瑣,分析大批量樣品時效率低,上述缺點在高通量篩選、檢測等場合尤為突出.為了克服該不足,實現(xiàn)蛋白含量的快速高通量測定,本研究基于Folin-酚法,利用96孔板作為反應(yīng)器并配合比色,建立了一種蛋白含量測定的微孔板方法并評價其合理性.該法測得樣品的蛋白含量與常規(guī)法結(jié)果無顯著性差異,反應(yīng)在30-90 min顯色穩(wěn)定,標準曲線的線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9922,標準偏差范圍為0.07%-0.78%,檢測限為10 μg.與常規(guī)法相比,微孔板法保持了Folin-酚法的準確性及穩(wěn)定性,同時具有通量高、節(jié)省樣品、試劑及測定時間等優(yōu)點,在蛋白高通量快速測定方面更具優(yōu)勢。

蛋白結(jié)晶板

為滿足固相時間分辨熒光分析(TRFIA)研究需要,采用固相載體改進技術(shù)研制用于檢測系統(tǒng)的聚微孔板,不僅提高TRFIA系統(tǒng)的靈敏度,而且可以把該技術(shù)應(yīng)用到其他分析技術(shù)、生物芯片技術(shù)、污水處理、發(fā)酵工藝、酶工程和親和層析,具有重要的現(xiàn)實意義。本文將聚微孔板內(nèi)表面固相功能化,研制一種在聚微孔板內(nèi)表面形成耐受強酸、強堿、的尼龍-6膜層,并在膜層表面化得到活性基團與己二酸二酰肼進行“手臂”連接,用雙功能基團活化,活化后的膜層與蛋白質(zhì)具有很高的連接性能和穩(wěn)定性。

蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個有小孔的毛細管中，一個測熔點用的毛細管一般即可（如圖1.2）。下層是密度大的溶液，例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑，它會在上層。以1：1混合，沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液（各自約5μl）通過針頭導(dǎo)入毛細管，先導(dǎo)入下層的。通過一個簡易的搖擺式離心機去除氣泡。再加入上層，進而兩層之間形成一個明顯的界面。