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三羥Tris,即氨,也叫緩血酸胺,是一種含氨基的三元醇,本身具有弱堿性,通常搭配弱酸作為生物緩沖劑,被廣泛用于生物化學和分子生物學中的生化檢測和試劑盒中。Tris(CAS77-86-1)不僅是重要的生物緩沖劑,同時也是有機合成的重要材料。雖然目前在涂料領(lǐng)域的應用還不是非常廣泛,但是隨著科學技術(shù)的發(fā)展以及國內(nèi)外相關(guān)研究人員對Tris應用研究的深入,相信未來三羥將在此領(lǐng)域得到更多的應用。
提到緩沖液就不得不延伸一下,這就是Henderson-Hasselbalch方程。
在前面提到,
將等式同時取對數(shù),并簡化就可以得到:
或者
這就是Henderson-Hasselbalch方程。
注意:式子中酸及其共軛堿的濃度都是平衡時的濃度,除了酸性過于強的情況下,由于同離子效應的存在,一般都可用此式計算。
許多緩沖液中含有NaCl,以幫助保持蛋白的可溶性和模擬生理條件。一般常用150 mM的NaCl。
在不同的蛋白純化步驟中,可能需要改變鹽離子的濃度。例如,如果是通過離子交換層析進行蛋白純化,一開始需要降低鹽離子的濃度(5~25mM)避免高離子強度和蛋白競爭和填料結(jié)合,這樣可防止蛋白從離子交換柱中流穿,從而使柱子能夠結(jié)合目的蛋白,洗脫除去雜蛋白。