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三羥(Tris(hydroxymethyl)
三羥(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為Tris)是一種有機(jī)化合物,其分子式為(HOCH2)3CNH2。Tris被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備。例如,在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100 ml 500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml 2.向燒杯中加入約800 ml的去離子水,均勻混合。 3.將溶液定容至1 L后,高溫高壓滅菌。 4.室溫保存。
Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)堿性較強(qiáng),可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液;對(duì)生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)pH受濃度影響較大,稀釋10倍,pH變化大于0.1溫度效應(yīng)大,除了Tris-HCl之外,tris還有多種衍生緩沖液:TBS=Tris-HCl NaCl KCl,常用于清洗染色的組織或Western Blotting中的蛋白印跡膜等;TBST=Tris-HCl NaCl tween20,做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液;TE=Tris-HCl EDTA,對(duì)DNA的堿基有保護(hù)性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲(chǔ)存;TAE=Tris base 乙酸 EDTA,是大片段DNA短時(shí)間電泳時(shí)廣泛使用的緩沖系統(tǒng);TBE=Trisbase 硼酸 EDTA,適用于長時(shí)間DNA電泳,對(duì)較小片段分離效果較好。
TRIS一般是做為生化學(xué)及藥理學(xué)中用于配備ph均衡的緩沖液,不能應(yīng)用在食品工業(yè)領(lǐng)域中,它歸屬于試驗(yàn)用溶劑不可以立即被身體服用的,近期的國家標(biāo)準(zhǔn)GB2016《食品添加劑標(biāo)準(zhǔn)》中沒有TRIS的文件目錄及較大 容許加上量,它現(xiàn)階段僅存有與《國家藥典》中請(qǐng)參照(行吧,TRIS放到食品類中,也真沒有人敢買的)。生物緩沖劑;用于凝膠電泳配備緩沖液。