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山東洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話

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發(fā)布時間:2020-08-06 05:11  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;高等植物中的GS同工酶主要分為兩類:胞質(zhì)型GS1主要同化從土壤吸收的初級氨及再同化從植物體內(nèi)各個N循環(huán)途徑所釋放的氨??梢蚤_展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。




分別用70%乙醇和滅菌蒸餾水清洗金粉(直徑為1 μm),加入滅菌蒸餾水制成金粉懸浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋蔥表皮的玻璃皿中,邊振蕩邊加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP質(zhì)粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亞精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振蕩混勻?;驑孏DS-80轟擊時氦氣罐的氣壓為1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒懸浮液加到基因槍中央,進(jìn)行轟擊,之后放置25℃避光過夜培養(yǎng),使用ConfocalLaser激光共聚焦顯微鏡觀察。植物脂肪酸除了在食品工業(yè)中具有重要價值以外,還在植物抗寒、抗害方面具有重要生。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;利用DW-ACP-PCR(DNAWalking-AnnealingControlPrimer-PCR)技術(shù)對T-DNA右邊界側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增,7個突變體都獲得了特異條帶??梢蚤_展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。




GaMYB2 在洋蔥表皮細(xì)胞中的瞬時表達(dá)分析:采用基因槍轟擊的方法,用包裹質(zhì)粒的金粉對洋蔥表皮進(jìn)行轟擊,暗培養(yǎng)過夜后,在激光共聚焦顯微鏡下進(jìn)行觀察,從圖A 中可以看出對照GFP空載體在整個洋蔥細(xì)胞均能看到綠色熒光,為組成型表達(dá);將擬南芥的硫酯酶基因atfata到原核表達(dá)載體pET30a上,在大腸BL21(DE3)中成功表達(dá)了His-tag融合蛋白,經(jīng)SDS-PAGE檢。從圖B 中發(fā)現(xiàn)GaMYB2-GFP 的融合表達(dá)載體只能在細(xì)胞核中能看到綠色熒光,這進(jìn)一步證明該蛋白不具有跨膜蛋白結(jié)構(gòu),定位在細(xì)胞核中,具有轉(zhuǎn)錄因子的一般特征。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;構(gòu)建PnCHI1的亞細(xì)胞定位載體,轉(zhuǎn)入洋蔥表皮細(xì)胞中瞬時表達(dá),在激光掃描共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)PnCHI1定位于細(xì)胞壁中??梢蚤_展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。




蔗果寡糖是寡糖中非常重要的一類,廣泛存在于洋蔥、香蔥、牛蒡、菊芋、香蕉、小麥、黑麥、燕麥中,形式多種多樣。其中菊粉中的蔗果寡糖的含量較豐富,占塊莖干重70%—80%。天然存在的蔗果寡糖是由微生物或植物中具有果糖基轉(zhuǎn)移活性的酶作用而產(chǎn)生的。目前生產(chǎn)的蔗果寡糖是將微生物中苷酶或果糖轉(zhuǎn)移酶作用于蔗糖而制備獲得。蔗果寡糖是雙歧因子,能促進(jìn)雙歧增殖,而雙歧是典型的有益菌,它可吸收,合成多種維生素,促進(jìn)腸蠕動,分泌乳酸,抑制某些有害菌生成,防止,增體等諸多功能。且攝入蔗果寡糖不會引起血糖值和胰島素升高,對受胰島素控制的肝糖原的合成也無影響,可以作為和患者的保健甜味劑。而人體內(nèi)雙歧的數(shù)目隨著年齡的增長,環(huán)境污染及的使用等原因,含量逐漸下降。僅從維持腸道中微生物區(qū)系平衡出發(fā),就應(yīng)該人為地補(bǔ)充雙歧。既然蔗果寡糖可以預(yù)防和調(diào)節(jié)多種疾病,并且對人體沒有任何毒副作用,被認(rèn)為營養(yǎng)型,已被許多國家批準(zhǔn)使用于食品、化妝品、藥品、飼料等。因此,可以通過加強(qiáng)蔗糖果糖基轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)來提高番茄果實(shí)中蔗果寡糖含量,培育出的富含蔗果寡糖的番茄果實(shí)具有很好的食用價值和發(fā)展前景。然而,由于P在土壤中容易被固定和沉淀,且植物從土壤中吸收的主要是無機(jī)態(tài)正磷酸鹽(Phosphate,Pi),故相對于其他營養(yǎng)元素,P在土壤中的移動性和有效性均很低,其也因此常常成為農(nóng)田及自然生態(tài)系統(tǒng)中植物生長的主要限制因子之一。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;)Merrill]是我國主要的糧食作物和油料作物,但土壤鹽漬化成為影響大豆生長和產(chǎn)量的主要限制因素之一??梢蚤_展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗。





F-box蛋白通過在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識別底物蛋白而參與細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動。很多研究結(jié)果表明F-box蛋白通過SCF復(fù)合體調(diào)節(jié)多種的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號傳導(dǎo),并且與植物對非生物脅迫的響應(yīng)有很大的關(guān)系。故其對植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類作物,主要生長在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點(diǎn)。經(jīng)過長時間的進(jìn)化和對不良環(huán)境的適應(yīng),鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢來研究植物的抗逆機(jī)制。目前,鷹嘴豆在分子生物學(xué)方面的研究較為少。 本研究從EST庫中挑選到兩個F-box蛋白基因在干旱脅迫下表達(dá),采用RACE技術(shù)其全長,并對目的基因進(jìn)行了初步的生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)譜分析,旨在為進(jìn)一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長發(fā)育及在逆境信號傳導(dǎo)中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 CarF-box1基因的開放閱讀框(ORF)長1093bp,編碼一條345個氨基酸殘基的多肽,含有F-box結(jié)構(gòu)域和Kelch結(jié)構(gòu)域。其理論等電點(diǎn)為5.38,分子量為38.37kDa。CarF-box1基因不含有內(nèi)含子。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達(dá),在花中表達(dá)極高。結(jié)論:紅樹Bet/ProT2基因能通過吸收甜菜堿和/或脯氨酸來降低氧化傷害,顯著提高轉(zhuǎn)基因水稻的耐鹽能力。


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