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福建亞細(xì)胞定位電話「多圖」

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發(fā)布時(shí)間:2020-08-03 06:23  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;但有關(guān)大豆Na /H 逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的生物學(xué)功能分析以及應(yīng)用的研究還很少。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-type ATPase(HMA)已被證實(shí)參與植物體內(nèi)的重金屬運(yùn)輸,HMA5主要參與銅的轉(zhuǎn)運(yùn)。在模式植物擬南芥、水稻和黃瓜中對HMA5基因進(jìn)行了較多的研究,但是對豆科植物HMA5的研究鮮見報(bào)道。實(shí)驗(yàn)室前期在天藍(lán)苜蓿中分離到一個(gè)與銅脅迫及共生結(jié)瘤相關(guān)的HMA5基因,為了對此類基因在豆科植物共生結(jié)瘤中的作用進(jìn)行深入研究,本研究對全基因組已測序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因組進(jìn)行篩查,尋找HMA5同源基因并通過表達(dá)模式分析初步判斷其與共生結(jié)瘤的關(guān)系,在此基礎(chǔ)上,以其中的MTR_8g079250基因?yàn)閷ο?進(jìn)行亞細(xì)胞定位、組織表達(dá)、RNA干擾和過量表達(dá)等研究,初步鑒定該基因在共生結(jié)瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亞細(xì)胞定位構(gòu)建MTR_8g079250的洋蔥表皮亞細(xì)胞定位載體,通過基因槍轟擊轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,在激光共聚焦顯微鏡下觀察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在細(xì)胞膜上表達(dá),在細(xì)胞核上也有微量的表達(dá);構(gòu)建MTR_8g079250的葉片亞細(xì)胞定位載體,通過根癌農(nóng)介導(dǎo)注射葉片的方式進(jìn)行轉(zhuǎn)化,結(jié)果表明目的基因主要定位在細(xì)胞膜和細(xì)胞核上;2、MTR_8g079250的組織表達(dá)構(gòu)建PMTR_8g079250::GUS融合表達(dá)載體,通過農(nóng)發(fā)根轉(zhuǎn)化的方式轉(zhuǎn)入蒺藜苜蓿根部,經(jīng)培養(yǎng)后,進(jìn)行GUS染色觀察。存植物基因工程育種中,與導(dǎo)入一個(gè)功能基因相比,導(dǎo)入一個(gè)關(guān)鍵的調(diào)控基因的改良效果更好。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;由稻瘟菌(Magnaporthegrisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞柑橘致病變種(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac)引起的一種病害,可影響大部分的商業(yè)柑橘栽培品種,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。選育抗病品種是解決該病害問題的根本途徑,其中,利用基因工程將抗病基因?qū)朐耘嗥贩N是解決柑橘病害的一條快速而有效的途徑。構(gòu)建PnCHI1的亞細(xì)胞定位載體,轉(zhuǎn)入洋蔥表皮細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá),在激光掃描共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)PnCHI1定位于細(xì)胞壁中。WRKY轉(zhuǎn)錄因子和病程相關(guān)蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs)在植物抗病信號調(diào)控途徑中起著重要作用。本研究根據(jù)柑橘潰瘍病高感品種紐荷爾臍橙(Citrus sinensis(L.)Osbeck)和高抗品種四季橘(Citrus madurensis)受潰瘍病侵染后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),篩選了在這兩個(gè)品種中表達(dá)差異顯著的24個(gè)WRKY和4個(gè)PR基因進(jìn)行研究,在此基礎(chǔ)上,詳細(xì)研究了4個(gè)WRKY基因和2個(gè)PR1基因在柑橘潰瘍病抗性中的功能和作用。具體研究結(jié)果如下:1.候選基因的和生物信息學(xué)分析了Cs WRKY22、Cs WRKY50、Cs WRKY72-1、Cs WRKY72-2、和Cs PR1-1、Cs PR1-2的編碼序列,ORF分別為921bp、480bp、1809bp、1767bp、501bp和480bp。用MEGA5.2軟件分析其與其他植物同家族蛋白氨基酸序列的親緣關(guān)系,并構(gòu)建進(jìn)化樹。發(fā)現(xiàn)Cs WRKY22與可可WRKY29,Cs WRKY50與棗WRKY50,Cs WRKY72與可可WRKY72,Cs PR1-1與可可PR-1,Cs PR1-2與龍眼PR-1的親緣關(guān)系較近。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。本研究旨在通過對根癌農(nóng)侵染洋蔥表皮細(xì)胞的條件進(jìn)行優(yōu)化,從而建立一種新的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng),并將其應(yīng)用于玉米In5-2啟動子的功能區(qū)域的分析中,明確In5-2啟動子的乙酰類化合物誘導(dǎo)元件的具體位置。





柑橘童期長達(dá)8年以上,嚴(yán)重阻礙了遺傳育種進(jìn)展,因此縮短童期有著十分重要的意義。作為柑橘類落葉果樹,枳/早實(shí)枳與大多數(shù)落葉的草本植物相似,需要經(jīng)過冬季低溫誘導(dǎo)(春化作用)才能開花。通過凍融法將重組質(zhì)粒pBRSAg轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)LBA4404中,利用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化葉盤,經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得植株。FLOWERING LOCUS C(FLC)是草本植物春化途徑關(guān)鍵基因。冬性一年生植物在秋季萌發(fā),在冬季前由于FLC高水平表達(dá)導(dǎo)致成花受到抑制,在冬季時(shí)由于低溫春化作用導(dǎo)致體內(nèi)FLC的表達(dá)量降低,并擁有在春天成花的能力。本實(shí)驗(yàn)室前期從枳中分離了FLC同源基因Pt FLC,發(fā)現(xiàn)Pt FLC在不同發(fā)育時(shí)期存在選擇性剪切,并分離出了五個(gè)轉(zhuǎn)錄本,這種調(diào)控方式與草本植物不同。為研究Pt FLC在枳/早實(shí)枳發(fā)育中的作用,本研究分別構(gòu)建了Pt FLC四個(gè)轉(zhuǎn)錄本Pt FLCv1、Pt FLCv2、Pt FLCv3和Pt FLCv5的超表達(dá)融合載體35S::Pt FLC-GUS與35S::Pt FLC-EGFP,以期獲得帶有標(biāo)記蛋白的轉(zhuǎn)基因早實(shí)枳,進(jìn)而對Pt FLC功能進(jìn)行研究。


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