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丹東洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話,武漢思特進(jìn)公司

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發(fā)布時(shí)間:2020-08-02 07:50  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光,從而可以地定位蛋白質(zhì)的位置。可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




GaMYB2 在洋蔥表皮細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)分析:采用基因槍轟擊的方法,用包裹質(zhì)粒的金粉對(duì)洋蔥表皮進(jìn)行轟擊,暗培養(yǎng)過(guò)夜后,在激光共聚焦顯微鏡下進(jìn)行觀察,從圖A 中可以看出對(duì)照GFP空載體在整個(gè)洋蔥細(xì)胞均能看到綠色熒光,為組成型表達(dá);在此基礎(chǔ)上,利用根癌農(nóng)介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化法進(jìn)行GmNHX1基因的遺傳轉(zhuǎn)化。從圖B 中發(fā)現(xiàn)GaMYB2-GFP 的融合表達(dá)載體只能在細(xì)胞核中能看到綠色熒光,這進(jìn)一步證明該蛋白不具有跨膜蛋白結(jié)構(gòu),定位在細(xì)胞核中,具有轉(zhuǎn)錄因子的一般特征。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);肌無(wú)力(Myastheniagravis,MG)主要是由乙酰受體(AChRAb)介導(dǎo)的、細(xì)胞依賴性、補(bǔ)體和多種參與的針對(duì)神經(jīng)-肌肉接頭(NMJ)處突觸后膜上乙酰受體(AChR)的自身性疾病,主要靶是骨骼肌??梢蚤_(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





目的研究1個(gè)白木香倍半萜合酶(ASS)的亞細(xì)胞定位,確定其功能區(qū)域,并比較3種瞬時(shí)表達(dá)體系在亞細(xì)胞定位研究中的優(yōu)劣。方法從白木香愈傷組織中提取總RNA,采用特異引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,并連接于pEZS-NL載體和pFGC5941GFP改造載體上,分別構(gòu)建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2種植物表達(dá)載體,分別利用根癌農(nóng)侵染葉片、基因槍轟擊洋蔥表皮細(xì)胞、PEG轉(zhuǎn)化白木香原生質(zhì)體3種技術(shù)進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)化表達(dá),激光共聚焦顯微鏡下觀察表達(dá)出的綠色熒光蛋白(GFP)融合蛋白的亞細(xì)胞定位。結(jié)果在葉片表皮細(xì)胞、洋蔥表皮細(xì)胞及白木香原生質(zhì)體中,融合蛋白綠色熒光均能被觀察到。ASS基因與GFP的融合蛋白產(chǎn)物在葉片中定位于胞質(zhì),在洋蔥表皮中定位于胞質(zhì)和細(xì)胞核,白木香原生質(zhì)體中定位于胞質(zhì)和質(zhì)體。結(jié)論:PnCHI1是定位于細(xì)胞壁的幾丁質(zhì)酶,體外能抑制幾種三七根腐病真菌,在過(guò)表達(dá)大大提高了對(duì)茄腐鐮刀菌的抗性,推測(cè)PnCHI1是三七中參與根腐病防衛(wèi)反應(yīng)的重要抗病基因。結(jié)論 ASS基因在白木香原生質(zhì)體胞質(zhì)及質(zhì)體定位;對(duì)3種體系的結(jié)果比較表明,應(yīng)用不同體系研究蛋白的亞細(xì)胞定位可能出現(xiàn)不同的結(jié)果,這可能與同源或異源表達(dá)的植物細(xì)胞的特性有關(guān)。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);構(gòu)建PnCHI1的亞細(xì)胞定位載體,轉(zhuǎn)入洋蔥表皮細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá),在激光掃描共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)PnCHI1定位于細(xì)胞壁中??梢蚤_(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




胞質(zhì)Ca~(2 )是重要的第二信使,通過(guò)Ca~(2 )結(jié)合蛋白產(chǎn)生磷酸化信號(hào)級(jí)聯(lián),調(diào)控下游基因表達(dá)。鈣依賴而鈣調(diào)素不依賴的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentprotein kinases,CDPKs)是一類僅在植物和部分原生生物中存在的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,在鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中具有重要功能。越來(lái)越多的證據(jù)表明,CDPKs廣泛參與植物生長(zhǎng)發(fā)育、病原防御、非生物環(huán)境脅迫等生理反應(yīng)的信號(hào)傳遞過(guò)程。目前在水稻中已發(fā)現(xiàn)31個(gè)CDPKs基因,但功能明確的只有少數(shù)幾個(gè)基因,本研究的目的就是利用超量表達(dá)和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技術(shù)分析水稻OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29的功能,為利用基因工程技術(shù)培育水稻新品種提供新的基因資源和理論指導(dǎo)。本研究的主要試驗(yàn)結(jié)果如下: 1.通過(guò)RT-PCR方法檢測(cè)了OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29三個(gè)基因在粳稻品種日本晴分蘗期的根、成熟葉片、穗尖至劍葉葉枕距離分別為0 cm、0-1cm、1-3 cm、3-5 cm、5-8 cm、8-12 cm、12-16 cm、16-20 cm、20-25 cm、25-30 cm、灌漿期稻穗(命名為P1-P12)中的表達(dá)譜。2)是植物N素同化途徑中較為關(guān)鍵的催化酶之一,被稱為是植物中無(wú)機(jī)態(tài)N轉(zhuǎn)化為有機(jī)態(tài)N的“門戶”,對(duì)植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogenuseefficiency)有著極為重要的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示:OsCPK2和OsCPK29時(shí)期稻穗中表達(dá)量較高,在成熟葉片和P12時(shí)期稻穗中表達(dá)量很低,在分蘗期的根和幼穗中不表達(dá);而OsCPK15在所檢測(cè)的各個(gè)組織和時(shí)期中表達(dá)量均很高。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);生物信息學(xué)分析顯示,ScBG1基因DNA序列全長(zhǎng)1175bp,編碼332個(gè)氨基酸,含有1個(gè)長(zhǎng)度為156bp的內(nèi)含子??梢蚤_(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





柑橘童期長(zhǎng)達(dá)8年以上,嚴(yán)重阻礙了遺傳育種進(jìn)展,因此縮短童期有著十分重要的意義。作為柑橘類落葉果樹(shù),枳/早實(shí)枳與大多數(shù)落葉的草本植物相似,需要經(jīng)過(guò)冬季低溫誘導(dǎo)(春化作用)才能開(kāi)花。FLOWERING LOCUS C(FLC)是草本植物春化途徑關(guān)鍵基因。冬性一年生植物在秋季萌發(fā),在冬季前由于FLC高水平表達(dá)導(dǎo)致成花受到抑制,在冬季時(shí)由于低溫春化作用導(dǎo)致體內(nèi)FLC的表達(dá)量降低,并擁有在春天成花的能力。本實(shí)驗(yàn)室前期從枳中分離了FLC同源基因Pt FLC,發(fā)現(xiàn)Pt FLC在不同發(fā)育時(shí)期存在選擇性剪切,并分離出了五個(gè)轉(zhuǎn)錄本,這種調(diào)控方式與草本植物不同。實(shí)驗(yàn)室前期研究表明,將來(lái)自水稻黃單胞菌(Xanthomonasoryzaepv。為研究Pt FLC在枳/早實(shí)枳發(fā)育中的作用,本研究分別構(gòu)建了Pt FLC四個(gè)轉(zhuǎn)錄本Pt FLCv1、Pt FLCv2、Pt FLCv3和Pt FLCv5的超表達(dá)融合載體35S::Pt FLC-GUS與35S::Pt FLC-EGFP,以期獲得帶有標(biāo)記蛋白的轉(zhuǎn)基因早實(shí)枳,進(jìn)而對(duì)Pt FLC功能進(jìn)行研究。


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