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發(fā)布時(shí)間:2020-07-28 14:49  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;方法首先采用Western印跡方法檢測(cè)過表達(dá)MAGI3后E-cadherin蛋白表達(dá)條帶的遷移變化,。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





采用根癌農(nóng)介導(dǎo)的方法,以受控于CaMV35S啟動(dòng)子的攜帶有GFP報(bào)告基因的雙元植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-35S-GFP轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞.熒光顯微鏡下觀察結(jié)果顯示,GFP基因在經(jīng)浸染和共培養(yǎng)后的洋蔥表皮細(xì)胞中得到了表達(dá),綠色熒光分布在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中,為進(jìn)一步研究新基因的亞細(xì)胞定位和瞬時(shí)表達(dá)奠定了基礎(chǔ).


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;0中,構(gòu)建成重組質(zhì)粒pYE/FAD2,轉(zhuǎn)化到釀酒酵母進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




構(gòu)建了植物表達(dá)載體pBRSAg,該載體具有完整的植物表達(dá)元件,CaMV35S啟動(dòng)子、農(nóng)T-DNA左右邊界、植物報(bào)告基因gus和植物選擇標(biāo)記基因hpt,適用于農(nóng)的轉(zhuǎn)化;通過凍融法將重組質(zhì)粒pBRSAg轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)LBA4404中,利用農(nóng)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化葉盤,經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得植株??剐灾仓杲?jīng)GUS染色和PCR檢測(cè)為陽性,初步表明表面抗原基因在中得到表達(dá)。分別用70%乙醇和滅菌蒸餾水清洗金粉(直徑為1μm),加入滅菌蒸餾水制成金粉懸浮液,取100μL放在含有1。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;結(jié)果顯示,真空滲透法和直接注射法在瞬時(shí)表達(dá)效率上差異不大,真空滲透操作上更簡(jiǎn)便、更易掌握。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





選取含有氯嘧磺隆抗性標(biāo)記的ILV1基因和報(bào)告基因GFP二元載體的農(nóng)AGL-1,采用單因子和雙因子方法研究根癌農(nóng)AGL-1介導(dǎo)柱花草菌CH008轉(zhuǎn)化過程中各主要因素對(duì)轉(zhuǎn)化率的影響,優(yōu)化構(gòu)建ATMT轉(zhuǎn)化柱花草膠孢菌體系條件,使轉(zhuǎn)化效率達(dá)到300~400個(gè)轉(zhuǎn)化子/106個(gè)孢子,即根癌農(nóng)AGL-1濃度OD600=0.8,菌分生孢子濃度為1×106個(gè)/mL,AS濃度為100 μmol/L,誘導(dǎo)時(shí)間為6 h,共培養(yǎng)溫度和時(shí)間分別為25 ℃和4 d。經(jīng)PCR檢測(cè)都有GFP片段,并能夠表達(dá)綠色熒光蛋白。本研究旨在通過和分析與馬鈴薯晚疫病抗性相關(guān)的泛素連接酶家族中的成員,初步揭示這類基因在馬鈴薯晚疫病垂直抗性和水平抗性中的調(diào)控作用,或它們?cè)隈R鈴薯防御晚疫病菌侵染的信號(hào)傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中的作用,為進(jìn)一步深入開展抗性機(jī)理研究奠定基礎(chǔ)。這為進(jìn)一步開展菌對(duì)柱花草的致病機(jī)理研究提供了依據(jù),優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系有利于后續(xù)突變體庫(kù)的擴(kuò)大、篩選突變體和致病功能基因的研究。


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