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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);用無菌牙簽將各個(gè)菌落先轉(zhuǎn)移至濾膜上,再轉(zhuǎn)移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
多彩色熒光原位雜交(Multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)是在熒光原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新技術(shù),它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交,能同時(shí)檢測多個(gè)靶位,各靶位在熒光顯微鏡下和照片上的顏色不同,呈現(xiàn)多種色彩,因而被稱為多彩色熒光原位雜交。原位PCR技術(shù)是常規(guī)的原位雜交技術(shù)與PCR技術(shù)的有機(jī)結(jié)合,即通過PCR技術(shù)對靶核酸序列在染色體上或組織細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行原位擴(kuò)增使其拷貝數(shù)增加,然后通過原位雜交技術(shù)進(jìn)行檢測,從而對靶核酸序列進(jìn)行定性、定位和定量分析。原位PCR技術(shù)大大提高了原位雜交技術(shù)的靈敏度和專一性,可用于低拷貝甚至單拷貝的基因定位,為原位雜交技術(shù)的發(fā)展提供了更廣闊的發(fā)展前景。然后依次經(jīng)2×SSC室溫浸洗1h,l×SSC室溫浸洗lh,0。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);,1986),在植物上早應(yīng)用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等2001??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。顯色以下各步均在室溫下進(jìn)行。
(1)緩沖液I洗1min。
(2)用含2%正常羊和0.3%TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。
(3)用含1%正常羊和0.3%TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。
(4)將稀釋液滴加在切片上,封口膜覆蓋,濕盒內(nèi)4℃孵育過夜。
(5)緩沖液I洗10min。
(6)緩沖液Ⅱ洗10min。
(7)加顯色液,封口膜覆蓋,避光室溫孵育2~20h,隨時(shí)鏡檢,當(dāng)顯色滿意時(shí)入緩沖液Ⅲ終止顯色。
顯色液臨用前配,其配方為:①NBT 45μl;②X-Phospllate液 35μl;③左旋咪唑 2.4mg;④緩沖液Ⅱ 加至10ml。
(8)常規(guī)脫水、透明、封固。
結(jié)果:雜交陽性信號(hào)為紫藍(lán)色顆粒。