武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);蔗果寡糖是寡糖中非常重要的一類,廣泛存在于洋蔥、香蔥、牛蒡、菊芋、香蕉、小麥、黑麥、燕麥中,形式多種多樣??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
植物修復(fù)(phytoremediation)是近來發(fā)展起來的一種利用合適的超富集植物徹底清除重金屬污染的綠色技術(shù)。該技術(shù)以其費(fèi)用低廉、生態(tài)友好等優(yōu)點(diǎn)成為環(huán)境科學(xué)的研究熱點(diǎn)。為了克服植物修復(fù)技術(shù)中超富集植物生長緩慢和可收獲的生物量小等的限制,將外源基因在植物.在此基礎(chǔ)上,利用根癌農(nóng)介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化法進(jìn)行GmNHX1基因的遺傳轉(zhuǎn)化。..
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);序列分析表明OsSsr1的開放閱讀框?yàn)?004bp,編碼一個(gè)由667個(gè)氨基酸組成并含有5個(gè)跨膜區(qū)的蛋白,該蛋白N端含有一個(gè)信號(hào)肽??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
F-box蛋白通過在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識(shí)別底物蛋白而參與細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動(dòng)。很多研究結(jié)果表明F-box蛋白通過SCF復(fù)合體調(diào)節(jié)多種的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號(hào)傳導(dǎo),并且與植物對(duì)非生物脅迫的響應(yīng)有很大的關(guān)系。故其對(duì)植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類作物,主要生長在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點(diǎn)。經(jīng)過長時(shí)間的進(jìn)化和對(duì)不良環(huán)境的適應(yīng),鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢來研究植物的抗逆機(jī)制。目前,鷹嘴豆在分子生物學(xué)方面的研究較為少。 本研究從EST庫中挑選到兩個(gè)F-box蛋白基因在干旱脅迫下表達(dá),采用RACE技術(shù)其全長,并對(duì)目的基因進(jìn)行了初步的生物信息學(xué)分析和轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)譜分析,旨在為進(jìn)一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長發(fā)育及在逆境信號(hào)傳導(dǎo)中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 CarF-box1基因的開放閱讀框(ORF)長1093bp,編碼一條345個(gè)氨基酸殘基的多肽,含有F-box結(jié)構(gòu)域和Kelch結(jié)構(gòu)域。其理論等電點(diǎn)為5.38,分子量為38.37kDa。構(gòu)建PnCHI1的原核表達(dá)載體,誘導(dǎo)并純化獲得重組蛋白,體外平板抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PnCHI1原核重組蛋白對(duì)尖孢鐮刀菌、茄腐鐮刀菌、輪枝鐮刀菌3種三七根腐病菌的菌絲生長具有很強(qiáng)的抑制活性。CarF-box1基因不含有內(nèi)含子。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達(dá),在花中表達(dá)極高。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);脂肪族昔(aliphaticglucosinolates,AGSL)是一種廣泛存在于十字花科植物中的含氮、含硫的植物次生代謝產(chǎn)物,其降解產(chǎn)物(如蘿卜硫素)不僅在植物防御、響應(yīng)生物或非生物脅迫的生理過程中具有重要的作用,而且還具有極強(qiáng)的活性??梢蚤_展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
選取含有氯嘧磺隆抗性標(biāo)記的ILV1基因和報(bào)告基因GFP二元載體的農(nóng)AGL-1,采用單因子和雙因子方法研究根癌農(nóng)AGL-1介導(dǎo)柱花草菌CH008轉(zhuǎn)化過程中各主要因素對(duì)轉(zhuǎn)化率的影響,優(yōu)化構(gòu)建ATMT轉(zhuǎn)化柱花草膠孢菌體系條件,使轉(zhuǎn)化效率達(dá)到300~400個(gè)轉(zhuǎn)化子/106個(gè)孢子,即根癌農(nóng)AGL-1濃度OD600=0.8,菌分生孢子濃度為1×106個(gè)/mL,AS濃度為100 μmol/L,誘導(dǎo)時(shí)間為6 h,共培養(yǎng)溫度和時(shí)間分別為25 ℃和4 d。經(jīng)PCR檢測都有GFP片段,并能夠表達(dá)綠色熒光蛋白。這為進(jìn)一步開展菌對(duì)柱花草的致病機(jī)理研究提供了依據(jù),優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系有利于后續(xù)突變體庫的擴(kuò)大、篩選突變體和致病功能基因的研究。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:濃度為1-7mmol/L的亞可抑制酵母細(xì)胞生長,并具有劑量依賴性,其中7mmol/L亞幾乎完全抑制了細(xì)胞的生長和分裂。