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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;去花處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,葉片中主要糖分是還原糖,塊莖、莖中主要是非還原糖。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
植物細(xì)胞壁抗降解屏障是限制秸稈生物質(zhì)資源化轉(zhuǎn)化利用的關(guān)鍵因素,而木質(zhì)纖維素的阿魏酸化是禾本科植物細(xì)胞壁抗降解屏障形成的重要分子基礎(chǔ)。植物阿魏酰基轉(zhuǎn)移酶(Feruloyl transferase)是負(fù)責(zé)將阿魏酸從阿魏酰CoA轉(zhuǎn)移至阿拉伯木聚糖分子上的關(guān)鍵酶之一,在阿拉伯木聚糖與木質(zhì)素的連接上起到關(guān)鍵作用,與植物細(xì)胞壁抗降解屏障的形成關(guān)系十分密切,因此對(duì)阿魏?;D(zhuǎn)移酶基因開(kāi)展研究將可以為禾本科能源植物開(kāi)發(fā)利用以及農(nóng)作物秸稈的再生利用提供新的思路。本文對(duì)禾本科模式植物二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的一個(gè)可能的阿魏?;D(zhuǎn)移酶基因Bra1進(jìn)行研究,其主要研究結(jié)果如下:1.以二穗短柄草成熟莖組織mRNA為材料,采用RT-PCR技術(shù)得到了Bra1(5g14720)基因的全長(zhǎng)cDNA序列,其序列大小為1369 bp,生物信息學(xué)分析表明該基因的開(kāi)放閱讀框(ORF)編碼443個(gè)氨基酸殘基,其編碼蛋白質(zhì)的理論分子質(zhì)量為48.45 kDa。進(jìn)一步的基因原核表達(dá)以及蛋白質(zhì)譜分析也表明該基因的開(kāi)放閱讀框能正確編碼一個(gè)BAHD?;D(zhuǎn)移酶蛋白,其分子量大小與理論值基本一致。天然存在的蔗果寡糖是由微生物或植物中具有果糖基轉(zhuǎn)移活性的酶作用而產(chǎn)生的。2.Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD?;D(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說(shuō)明Bra1基因是BAHD?;D(zhuǎn)移酶基因家族的一個(gè)成員。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;本研究旨在通過(guò)對(duì)根癌農(nóng)侵染洋蔥表皮細(xì)胞的條件進(jìn)行優(yōu)化,從而建立一種新的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng),并將其應(yīng)用于玉米In5-2啟動(dòng)子的功能區(qū)域的分析中,明確In5-2啟動(dòng)子的乙酰類(lèi)化合物誘導(dǎo)元件的具體位置。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途徑中較為關(guān)鍵的催化酶之一,被稱為是植物中無(wú)機(jī)態(tài)N轉(zhuǎn)化為有機(jī)態(tài)N的“門(mén)戶”,對(duì)植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有著極為重要的影響。高等植物中的GS同工酶主要分為兩類(lèi):胞質(zhì)型GS1主要同化從土壤吸收的初級(jí)氨及再同化從植物體內(nèi)各個(gè)N循環(huán)途徑所釋放的氨;質(zhì)體型GS2同化由NO3--N還原而來(lái)及光呼吸過(guò)程所釋放的氨。N素供應(yīng)對(duì)甜瓜的生長(zhǎng)發(fā)育、果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)形成有非常重要的影響,目前甜瓜N素代謝研究還停留在N營(yíng)養(yǎng)生理與果實(shí)品質(zhì)及產(chǎn)量層面,在分子機(jī)理水平的研究報(bào)道很少,尤其是對(duì)與N素同化和利用效率緊密相關(guān)的GS酶基因的研究還是空白。從圖B中發(fā)現(xiàn)GaMYB2-GFP的融合表達(dá)載體只能在細(xì)胞核中能看到綠色熒光,這進(jìn)一步證明該蛋白不具有跨膜蛋白結(jié)構(gòu),定位在細(xì)胞核中,具有轉(zhuǎn)錄因子的一般特征。因此,本文以甜瓜作為對(duì)象,在從甜瓜中出胞質(zhì)型GS基因M-GS1的基礎(chǔ)上,對(duì)M-GS1及課題組到的甜瓜質(zhì)體型GS基因M-GS2的基因組拷貝數(shù)、表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及生化特性、在甜瓜中的表達(dá)調(diào)控特征等進(jìn)行了研究和對(duì)比分析,從基因、蛋白質(zhì)和細(xì)胞水平對(duì)甜瓜GS基因進(jìn)行了系統(tǒng)的功能驗(yàn)證和鑒定,開(kāi)展了甜瓜N營(yíng)養(yǎng)代謝的分子生理研究;進(jìn)而在植株水平研究M-GS1在轉(zhuǎn)基因超量表達(dá)后提高植株N素同化效率的潛能,為甜瓜GS基因的應(yīng)用、利用GS基因改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依據(jù)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;3構(gòu)建綠色熒光蛋白融合表達(dá)載體,利用根癌農(nóng)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)。公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
以生菜、洋蔥、蘿卜為試材,用轉(zhuǎn)人植物表達(dá)載體pSH-NGN的根癌農(nóng)EHA105分別 采用真空滲透法和直接注射法瞬時(shí)表達(dá)ChIFN-γ蛋白,研究其宿主植物和方法。結(jié)果顯示,真空滲透法和直接注射法在瞬時(shí)表達(dá)效率上差異不大,真 空滲透操作上更簡(jiǎn)便、更易掌握;新鮮市售生菜,真空抽氣25min,共培養(yǎng)3d,瞬時(shí)表達(dá)效率達(dá)到3645pg/g,ChIFN-γ 蛋白得到表達(dá)。本研究分離出蒙古冰草MwLEA3基因并進(jìn)行了功能驗(yàn)證,并得到了蒙古冰草類(lèi)反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子。