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洋蔥亞細(xì)胞定位培養(yǎng)電話(huà)「在線(xiàn)咨詢(xún)」

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發(fā)布時(shí)間:2021-10-14 15:24  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。利用洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行的StRFP-GFP融合蛋白亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示,StRFP在細(xì)胞膜上或膜外表達(dá)。




植物油脂是人們膳食的主要成份,人類(lèi)日常生活及飲食所需的油脂有71%來(lái)自植物油。2軟件分析其與其他植物同家族蛋白氨基酸序列的親緣關(guān)系,并構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)。它主要是以三乙酰甘油(TAG)形式存在,而TAG的主要功能和經(jīng)濟(jì)價(jià)值是由脂肪酸組成的不同決定的。植物脂肪酸除了在食品工業(yè)中具有重要價(jià)值以外,還在植物抗寒、抗害方面具有重要生...


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[背景與目的]脂肪酸合酶(Fatty acid synthase, FASN)是脂肪酸生物合成過(guò)程中將小分子碳單位聚合成長(zhǎng)鏈脂肪酸的關(guān)鍵酶,能夠調(diào)控內(nèi)源性脂肪酸的合成,其主要產(chǎn)物是軟脂酸,并且以甘油三酯的形式存儲(chǔ)能量,主要參與磷脂合成、細(xì)胞膜構(gòu)造、肺表面活性物質(zhì)生成、細(xì).泛素-蛋白酶體通路在植物防衛(wèi)反應(yīng)(包括反應(yīng))中發(fā)揮重要作用,泛素連接酶(ubiquitinligase,E3)則是參與這一過(guò)程的重要組分。..


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目的研究1個(gè)白木香倍半萜合酶(ASS)的亞細(xì)胞定位,確定其功能區(qū)域,并比較3種瞬時(shí)表達(dá)體系在亞細(xì)胞定位研究中的優(yōu)劣。方法從白木香愈傷組織中提取總RNA,采用特異引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,并連接于pEZS-NL載體和pFGC5941GFP改造載體上,分別構(gòu)建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2種植物表達(dá)載體,分別利用根癌農(nóng)侵染葉片、基因槍轟擊洋蔥表皮細(xì)胞、PEG轉(zhuǎn)化白木香原生質(zhì)體3種技術(shù)進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)化表達(dá),激光共聚焦顯微鏡下觀察表達(dá)出的綠色熒光蛋白(GFP)融合蛋白的亞細(xì)胞定位。同時(shí),構(gòu)建了含不同長(zhǎng)度的玉米(Zeamays)In5-2啟動(dòng)子片段缺失載體,利用新的瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)分析其功能區(qū)域,推測(cè)出乙酰類(lèi)化合物誘導(dǎo)元件位于ATG上游-220~-143bp之間。結(jié)果在葉片表皮細(xì)胞、洋蔥表皮細(xì)胞及白木香原生質(zhì)體中,融合蛋白綠色熒光均能被觀察到。ASS基因與GFP的融合蛋白產(chǎn)物在葉片中定位于胞質(zhì),在洋蔥表皮中定位于胞質(zhì)和細(xì)胞核,白木香原生質(zhì)體中定位于胞質(zhì)和質(zhì)體。結(jié)論 ASS基因在白木香原生質(zhì)體胞質(zhì)及質(zhì)體定位;對(duì)3種體系的結(jié)果比較表明,應(yīng)用不同體系研究蛋白的亞細(xì)胞定位可能出現(xiàn)不同的結(jié)果,這可能與同源或異源表達(dá)的植物細(xì)胞的特性有關(guān)。


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大豆[Glycine max(L.)Merrill]是我國(guó)主要的糧食作物和油料作物,但土壤鹽漬化成為影響大豆生長(zhǎng)和產(chǎn)量的主要限制因素之一。近年來(lái),基因工程技術(shù)被廣泛應(yīng)用于提高植物的耐鹽性,將抗逆基因?qū)雰?yōu)良大豆品種,培育抗逆高產(chǎn)新品系,為解決這一問(wèn)題提供了新途徑。大豆花葉病毒病分布非常廣泛,是一種世界害,它嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。目前已有多個(gè)耐鹽相關(guān)基因應(yīng)用于植物抗逆研究,其中Na /H 逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因家族研究較為深入,其主要作用是通過(guò)將細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的Na 外排到胞外或者將Na 區(qū)隔化到液泡中,來(lái)維持細(xì)胞內(nèi)的Na 穩(wěn)態(tài)和Na /K 比相對(duì)穩(wěn)定,從而減少鹽脅迫對(duì)植株造成的傷害。但有關(guān)大豆Na /H 逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的生物學(xué)功能分析以及應(yīng)用的研究還很少。本研究以超表達(dá)Gm NHX1基因的擬南芥及酵母nhx1缺失突變體為材料,通過(guò)非損傷微測(cè)技術(shù)、real-time PCR以及酵母互補(bǔ)試驗(yàn),驗(yàn)證Gm NHX1基因的耐鹽功能;借助基因槍法轉(zhuǎn)化洋蔥,觀察Gm NHX1蛋白的亞細(xì)胞定位。在此基礎(chǔ)上,利用根癌農(nóng)介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化法進(jìn)行Gm NHX1基因的遺傳轉(zhuǎn)化。


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