【廣告】
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;將濾膜轉到盛有150ml預雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預雜交1-2小時。可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)技術是在已有的性原位雜交技術的基礎上發(fā)展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術。它利用熒光標記的核酸片段為探針,與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N:~行雜交,通過熒光檢測系統(tǒng)(熒光顯微鏡)檢測信號DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列,進而確定其雜交位點。FISH技術檢測時間短,檢測靈敏度高,無污染,已廣泛應用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領域。FISH是原位雜交技術大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實驗室逐步進入臨床診斷領域。 基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。變性的核酸分子慢慢冷卻,互補的堿基對之間又會重新形成雙鏈分子,這一過程叫作核酸的復性作用或退火。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;③FISH通過多次化學反應,使雜交信號增強,靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當。可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
用于原位雜交的探針可以是單鏈或雙鏈DNA,也可以是RNA探針。通常探針操作的長度以100-400nt為宜,過長則雜交率減低。近研究結果表明,寡核苷酸探針(16-30 nt)能自由出入細菌和組織細胞壁,雜交效率明顯高于長探針,因此,寡核苷酸探針和不對稱PCR標記的小DNA探針或體外轉錄標記的RNA探針是組織原位雜交優(yōu)選探針。在水產方面,原位雜交技術則主要應用于基因定位(多見于對魚類和貝類等水生物的研究)和病毒的檢測(多見于蝦類)。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;根據異源單鏈核酸分子間因結構互補發(fā)生共價鍵結合,能形成互補雜合雙鏈,而進行分子遺傳學研究的一種技術??梢蚤_展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
與其他原位雜交技術相比,熒光原位雜交具有很多優(yōu)點,主要體現(xiàn)在:①FISH不需要性同位素標記,更經濟安全。②FISH的實驗周期短,探針穩(wěn)定性高,特異性好,定位準確,能迅速得到結果。③FISH通過多次化學反應,使雜交信號增強,靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當。④多色FISH通過在同一個核中顯示不同的顏色可同時檢測多種序列。⑤既可以在玻片上顯示中期染色體數量或結構的變化。熒光標記探針不對環(huán)境構成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮短因單個探針分開使用導致的周期過程和技術障礙。也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結構。 [1]
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。