武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。發(fā)育時間越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶處理,發(fā)育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織,以便于雜交。
目的探討熒光原位雜交(FISH)技術(shù)在檢測胎兒染色體異常的臨床應(yīng)用。方法選用13、21、18、X、Y特異性探針對1128例孕16~22周有產(chǎn)前診斷指征的婦女羊水間期細(xì)胞進(jìn)行分析,并與同時進(jìn)行的羊水細(xì)胞培養(yǎng)核型分析結(jié)果進(jìn)行對照。結(jié)果被檢1128例羊水間期細(xì)胞FISH檢測均成功,其中檢出正常核型1081例,數(shù)目異常核型20例,與常規(guī)細(xì)胞染色體核型分析結(jié)果一致,另外27例結(jié)構(gòu)異常FISH技術(shù)未能檢出。結(jié)論 FISH技術(shù)檢測胎兒染色體數(shù)目異常具有快速、簡便、準(zhǔn)確性高、特異性強等優(yōu)點,有較大的臨床應(yīng)用價值,并對產(chǎn)前細(xì)胞遺傳學(xué)診斷有重要意義。武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復(fù)雜的染色體易位和微小缺失,區(qū)分間期細(xì)胞多倍體和超二倍體等。
同其他的生物技術(shù)一樣,原位雜交技術(shù)在其發(fā)展與應(yīng)用的過程中會出現(xiàn)一些問題,但隨著原位雜交技術(shù)的不斷改進(jìn)與完善以及檢測手段的改進(jìn),原位雜交技術(shù)的優(yōu)越性越來越突出,其應(yīng)用也會更加廣泛。
熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH)技術(shù)問世于20世紀(jì)70年代后期,其基本原理是利用標(biāo)記了熒光素的核酸作為探針,按照堿基互補原則,與待檢樣本中與之互補的核酸經(jīng)過變性-退火而形成雜交雙鏈核酸,通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測和分析。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。根據(jù)異源單鏈核酸分子間因結(jié)構(gòu)互補發(fā)生共價鍵結(jié)合,能形成互補雜合雙鏈,而進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究的一種技術(shù)。
陰性對照用已知不存在相應(yīng)靶序列的組織標(biāo)本雜交,結(jié)果應(yīng)為陰性。陰性對照可排除在雜交過程中由于非特異性雜交反應(yīng)等因素造成的假陽性結(jié)果。
陽性對照用已知含靶序列的組織切片與待檢標(biāo)本同樣處理,結(jié)果應(yīng)為陽性,稱陽性對照。FISH技術(shù)檢測時間短,檢測靈敏度高,無污染,已廣泛應(yīng)用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領(lǐng)域。通過陽性對照可證明雜交過程中各個步驟以及所使用的試劑都合乎標(biāo)準(zhǔn),實驗方法可靠。尤其當(dāng)待檢標(biāo)本為陰性時,陽性對照片呈陽性反應(yīng)可排除待檢標(biāo)本假陰性的可能。故若預(yù)期雜交結(jié)果為陰性時,就必須設(shè)陽性對照,當(dāng)陽性對照亦不顯色,就證明雜交過程的某一步驟或所用試劑問題。
(簡稱原位雜交,in situ hybridization histochemistry;ISHH)屬于分子雜交的一種,是一種應(yīng)用標(biāo)記探針與組織細(xì)胞中的待測核酸雜交,再應(yīng)用標(biāo)記物相關(guān)的檢測系統(tǒng),在核酸原有的位置將其顯示出來的一種檢測技術(shù)。②FISH的實驗周期短,探針穩(wěn)定性高,特異性好,定位準(zhǔn)確,能迅速得到結(jié)果。原位雜交的本質(zhì)就是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規(guī)則與組織細(xì)胞內(nèi)待測的核酸復(fù)性結(jié)合而使得組織細(xì)胞中的特異性核酸得到定位,并通過探針上所標(biāo)記的檢測系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來。