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反相模式下，溶劑體系的極性應以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標物，所選擇的淋洗劑應在不洗脫目標物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應能碰巧完全洗脫目標物。

正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團極性相互作用；極性力比非極性力強，但比離子力弱；常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力，因為弱極化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團。結(jié)果表明： SPE正相萃取后，樣品基質(zhì)多為弱極性，如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等，而目標物多含有極性官能團。

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渠道效應

當 SPE小柱填料裝實后，流速過小柱時，液體是以層流通過填料層，將填料層充分浸潤，潤濕的液面截層向上推進，見附圖；流速過大時，柱床厚度過大，可能在填料內(nèi)形成溝道，液流將穿過溝道，快速通過小柱，而使填料浸潤不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減少，嚴重影響填料對目標物質(zhì)的保留性。

溶液環(huán)境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性，我們?yōu)槭裁匆P(guān)注該化合物的 pKa值，這些因素需要放在C18柱狀物上嗎？

A：首先， Ka指酸度系數(shù)，也稱為酸離解常數(shù)，可以被理解為酸離解H離子的能力，而 pKa=- lgKa，對于酸，在環(huán)境中 pH離子的平衡如下

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選用 SPE柱規(guī)格的原則是，首先要確保 SPE柱的填料具有足夠的容量，以便將目標化合物100%保留在柱體上。另外，填料也不易過量。填充物越多，溶劑對目標化合物的洗脫效果就越好。

所以在選擇 SPE柱規(guī)格時，一定要考慮 SPE柱的容量。柱容是指一單位質(zhì)量的填料以主要力保持其質(zhì)量。鍵合型硅膠柱容量一般為1%~5%。

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例如， SPE柱的填料為100 mg，其大容量一般不超過5 mg。該離子交換劑柱容量約為0.5~1.5 meq/g。需要指出的是，由于我們面對的是多種混合物，除了目標化混合物之外，還存在很多干擾。

因此，在選擇柱狀規(guī)格時，必須考慮到目標化合物及其在萃取條件下可能吸附的總數(shù)量，而不能只考慮目標化合物。另外，即使目標化合物未超過柱容量， SPE柱在保留目標化合物的同時也保留了部分干擾物，由于兩者的總量已超過柱容量，其結(jié)果必然是部分目標化合物無法保留在 SPE柱中。所以為安全起見，建議柱容好比目標化合物估計含量高一倍。

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在填充壓實后， SPE小柱的填料形成柱床，當溶劑流過小柱時，速度過快會產(chǎn)生兩個問題：一是對粘結(jié)相填料而言，由于流速過快，使其不能充分浸潤舒展，從而導致其保留活性降低；二是過快的流速會使小柱形成溝槽，使小柱沒有充分浸潤，從而減少吸附填料與樣品的接觸面積，影響目標物質(zhì)的傳質(zhì)過程，從而降低回收率。

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當 SPE小柱填料裝實后，流速過小柱時，液體是以層流通過填料層，將填料層充分浸潤，潤濕的液面截層向上推進，見附圖；流速過大時，柱床厚度過大時，可能在填料內(nèi)形成溝道，液流將穿過溝道，快速通過小柱，而使填料浸潤不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減小，嚴重影響填料對目標物質(zhì)的保留性。

凈化方式的 SPE常用于吸附雜質(zhì)，富集方式常用于吸附目標物質(zhì)， GCB是一種石墨化碳黑，是在惰性氣氛下將炭黑加熱至2700-3000℃烘焙而成，它由六個碳原子組成平面六角形，層疊而成，對于芳香平面分子易于嵌入，且吸附能力強，對芳香化合物具有較強的選擇性，對其它分析物具有較好的吸附性能，但 GCB的吸附和解吸性能會直接影響到填料的使用范圍，對 GCB的吸附能力較強，但對 GCB的吸附能力稍差，需要選擇適當強度的溶劑來釋放所吸附的物質(zhì)，因此，解析溶劑的匹配比較困難，由于其對色素等的優(yōu)異吸附性能，因此在農(nóng)殘樣品處理中，常用于吸附色素等雜質(zhì)，而不是用于吸附目標化合物。

洗脫和收集分析物(另一種情況是保留雜質(zhì)而分析物通過柱子)

在反相萃取柱上，清潔溶劑為含有農(nóng)業(yè)生產(chǎn)系統(tǒng)適當濃度的溶劑的水或緩沖液；

為確定清洗溶劑的濃度和體積，將試樣加到 SPE柱上，用5~10倍 SPE柱體積的溶劑進行清洗，對流出液進行連續(xù)分析，得到清洗溶劑對分析物的洗脫曲線。按順序增大清洗溶劑強度，根據(jù)分析物在不同強度下的洗脫曲線，確定合適的清洗溶劑強度和體積；

洗脫和收集目的：將分析物全部洗脫并以小體積級分方式收集分析物，同時在 SPE柱上盡可能保留比分離物保留力更強的雜質(zhì)；

收集的分析物級分可被氮氣吹干，然后溶解在小體積溶劑中，以提高分析物的濃度，或調(diào)整溶劑性質(zhì)以作后期分析。