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篩選顆粒進(jìn)入 HPLC系統(tǒng)后，柱子的入口端被篩板擋住，終導(dǎo)致柱子堵塞，表現(xiàn)出系統(tǒng)壓力增大，色譜峰變形。為此，應(yīng)采取多種預(yù)防措施，包括商品儀器本身的操作步驟及各種過濾設(shè)計(jì)，努力防止或減少微粒進(jìn)入 HPLC系統(tǒng)，從而延長儀器及色譜柱的使用壽命，提高數(shù)據(jù)的可靠性。HPLC系統(tǒng)中，顆粒物的來源主要有三種：流動(dòng)相、試樣以及儀器系統(tǒng)各部件的磨損。1、流動(dòng)相若流動(dòng)相都是 HPLC級(jí)溶劑，則無需對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過濾。由于 HPLC級(jí)別的，如、等，在生產(chǎn)工藝過程中均經(jīng)過0.2μ m微孔濾膜過濾。與此類似，不管你是購買的 HPLC級(jí)別的水，還是用實(shí)驗(yàn)室的超純水凈化系統(tǒng)配制而成，一步也要經(jīng)過0.2μ m的微孔過濾器。

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流相通過0.45μ m的微孔濾膜過濾是去除流動(dòng)相中所有顆粒的一種有效方法。0.2μ m微孔的濾膜也能用，但就這一應(yīng)用而言，它們并不比0.45μ m的微孔濾膜更有效，過濾速度會(huì)更慢，尤其是在實(shí)驗(yàn)室所用試劑和水質(zhì)量不佳的情況下。有人建議，實(shí)驗(yàn)室在編寫其流動(dòng)相制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOPs)時(shí)，應(yīng)借鑒國際上同類實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定，即：只用 HPLC級(jí)液體制備流動(dòng)相時(shí)無需過濾，相反，所有流動(dòng)相組成在使用前都要過濾。輸液瓶與泵接的輸液管末端入口采用沉式過濾器(一般材料為熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬兩種)。這種濾清器規(guī)格為大于10μ m的微孔物質(zhì)，因此它不能替代流動(dòng)相過濾步驟，但它可以清除系統(tǒng)內(nèi)的灰塵，保證儲(chǔ)液瓶、輸液管使用的可靠性。

儀表系統(tǒng)部件的磨損另外，在 HPLC系統(tǒng)中，另一個(gè)重要的微粒體是輸液泵的密封墊和進(jìn)樣閥旋轉(zhuǎn)軸磨損。對(duì)輸液泵密封墊片磨損更換有兩種不同建議。個(gè)建議是，在普通實(shí)驗(yàn)室輸液泵的密封墊使用壽命一般為六個(gè)月至一年，因此建議半年或一年更換這些密封墊，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)上述觀點(diǎn)制定定期的預(yù)防性保養(yǎng)計(jì)劃。此觀點(diǎn)認(rèn)為，相對(duì)于輸液泵中的密封墊顆粒堵塞柱子進(jìn)行更換費(fèi)用而言，更換密封墊的成本要低一些。有些輸注泵配有玻璃砂芯或篩網(wǎng)，可濾掉泵密封墊中磨損的微粒，防止這些微粒隨流動(dòng)相流向柱頭。如果這種設(shè)備應(yīng)該參考輸液泵使用說明書，查看建議的清洗或更換過濾器的間隔時(shí)間。還有一種建議是，原來密封墊的密封效果好，更換后容易造成流動(dòng)相滲漏。因此，不要輕易更換密封墊，只要不漏液。沖洗保證 HPLC系統(tǒng)正常工作的第三個(gè)關(guān)鍵是保持系統(tǒng)的干凈。您必須關(guān)注流經(jīng)系統(tǒng)的所有流動(dòng)相，對(duì)于這些地方經(jīng)常出現(xiàn)的沖洗會(huì)使您的系統(tǒng)處于“Ready”狀態(tài)。

流動(dòng)相儲(chǔ)罐開始時(shí)要經(jīng)常清洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶，或每做一批新的樣品來替換流動(dòng)相。注入的流動(dòng)相會(huì)受到不潔的貯液瓶的污染。在儲(chǔ)存罐中，緩沖液的使用時(shí)間不能超過一周，的使用時(shí)間不能超過一個(gè)月。還有人建議在儲(chǔ)液瓶中用溶劑填充，直到更換分析方法儲(chǔ)液瓶需要更換新的溶劑(流動(dòng)相組成發(fā)生變化)時(shí)，將舊的溶劑倒掉更換新的溶劑，這樣比把溶劑用完更好。但是對(duì)于分析樣本較少的實(shí)驗(yàn)室來說，這似乎有點(diǎn)浪費(fèi)。儀表公司的工程師建議儲(chǔ)水瓶每天都要更換，每個(gè)星期還要用異清洗一次。有些實(shí)驗(yàn)室則在水中添加0.1~1 mM的甲酸，以抑制微生物生長。這樣的作法看似繁雜，卻能起到“磨刀不誤”的作用。

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一般情況下，更換活塞密封墊后，應(yīng)按照密封墊安裝的步驟進(jìn)行磨合，但不能用在正相密封墊上?！町?dāng)泵頭安裝有柱塞清洗附件時(shí)，由于該附件中還設(shè)有密封墊，因此活塞桿運(yùn)動(dòng)時(shí)的阻力將增大。因此在開泵之前，一定要用10%的異，并把它的流速調(diào)到大約2-3滴/分鐘，使溶液流過沖洗裝置。(對(duì) SL泵來說，如果不用鹽溶液即可)10%異可以幫助降低水的表面張力，具有抑制細(xì)菌的作用。請(qǐng)勿使用其他溶劑。如果泵頭沒有打開10%異，安裝沖洗附件，就會(huì)縮短密封墊和活塞桿的壽命(除二元泵 SL外)，泵頭如果發(fā)出“吱吱”聲不影響使用和泵的精度，可改變壓縮因子(compressibility)。

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自動(dòng)進(jìn)樣器樣本必須在進(jìn)樣前進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，要經(jīng)過亞微米級(jí)濾膜的過濾或離心，以防止樣品中的微小顆粒堵塞管道，好是用流動(dòng)相作為配制樣品的溶劑，該溶劑對(duì)樣品應(yīng)具有良好的溶解性能。當(dāng)喇叭口朝上暴露在空氣中時(shí)，有時(shí)空氣中較大的塵埃顆粒碰巧落在針座的流道內(nèi)，導(dǎo)致針座堵塞。此時(shí)可試著將針座卸下來，把它接在泵出口上反沖，一般可以解決問題。如緩沖液頻繁使用， ALS計(jì)量泵除泵頭外的柱塞和密封圈，應(yīng)定期清洗六通閥的轉(zhuǎn)子密封圈和定子密封圈，防止有鹽粒子磨損 ALS必須使用 Agilent的樣品瓶及瓶蓋；使用不兼容的或加工精度差的樣品瓶及瓶蓋，會(huì)導(dǎo)致 ALS故障率上升，并降低產(chǎn)品性能。