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液相色譜儀輸液系統(tǒng):
輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵,其作用是提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的流量。
1、溶劑過濾頭。液體過濾頭或沉淀器主要用于過濾在流動相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長期使用后,雜質(zhì)會堵塞溶劑過濾頭的濾板孔隙,或長期使用緩沖液,過濾頭表面很容易形成一層膜,妨礙正常的流動相通過。嚴(yán)重者,即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑,泵吸液時仍會有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生,因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液,正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。
2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個方向流動,保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中,可通過觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過一定時間平衡,壓力應(yīng)穩(wěn)定。但是如果有壓力波動,就表示流量是不穩(wěn)定的,如果沒有壓力,表示沒有流動。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡,應(yīng)將放空閥打開,按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起,必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇,安裝時要注意標(biāo)記環(huán)向。
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一九七五年,由美國 Dow Chemical公司 Small等人開發(fā)出一種新型的離子交換色譜儀器,該儀器采用電導(dǎo)率檢測器,從高本底電導(dǎo)中分離出無機(jī)、有機(jī)離子,這種方法稱為離子色譜(IC)。離子層析技術(shù)使 HPLC的分析領(lǐng)域擴(kuò)展到了大多數(shù)常見的無機(jī)、有機(jī)陰離子和60多種金屬陽離子的分析。近幾年來,為了滿足復(fù)雜樣品對分離柱效的需要,采用更細(xì)粒徑固定相超高壓液相色譜(UPLC),大大提高了分離效率,使液相色譜的應(yīng)用范圍更廣。本儀器主要由進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、在線檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成。
20世紀(jì)80年代,國外許多分析儀器制造商開始投入大量的資金和技術(shù)力量,研制開發(fā) HPLC產(chǎn)品。大量美國、日本、法國等 HPLC儀器制造商,如美國 Waters、 HP、 SP、 Beckman、日本的島津、日立、 JASCO、法國的吉爾森等公司紛紛推出自己的產(chǎn)品,產(chǎn)品更新?lián)Q代快,性能不斷提高。例如,日本島津公司在不到十年的時間里,LC-3A、LC-4A、LC-5A、LC-6A、LC-7A、LC-8A、LC-9A、LC-10A、LC-20A等十代產(chǎn)品的發(fā)展勢頭非常迅猛。隨著液相色譜儀器性能的不斷提高,各種新的分離方式也不斷出現(xiàn),使得液相色譜無論在技術(shù)上還是儀器上,都有了一個又一個的飛躍。
SCIEX毛細(xì)管電泳儀代理——廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司可為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)所需要的SCIEX耗材
電泳基本原理:
雙層:
雙電離子層是兩相分離的表面由相對固定和游離的兩部分組成。
雙電離子層是異號表面的離子層,任何浸入液體中的界面都會形成雙電層。對于毛細(xì)管電泳,在毛細(xì)管電泳中,其表面和壁面均存在雙電層。
Zeta電位:
介電性溶液中的任何帶電粒子都可以看作是雙電層系統(tǒng)的一部分,異號的帶電離子被異號的帶電離子中和,異號離子中有些被不可逆的吸附到離子上,而其他離子游離在附近,擴(kuò)散到電介質(zhì)中進(jìn)行離子交換?!付ā闺x子有一個切面,這個切面與離得近的離子間的電位稱為 Zeta電位。
在一種介質(zhì)中,帶電粒子在直流電場作用下發(fā)生的定向運(yùn)動稱為電泳。單元電位下的電泳速度被稱為滴度。用無i限稀釋溶液(稀溶液數(shù)據(jù)外推)測得的濁度稱為絕i對濁度。
帶電離子在電場中的運(yùn)動,除受電場力的作用外,還受溶劑阻力的影響。經(jīng)過一定的時間,兩種力的作用將達(dá)到平衡,此時離子做勻速運(yùn)動,電泳進(jìn)入穩(wěn)態(tài)。真實(shí)的溶液活度不同,尤其是酸堿度不同,因此,樣品分子的離解度不同,電荷也會發(fā)生變化,這個時候的濁度就可以稱為有效電泳。一般而言,離子的電荷越多、離解度越大、體積越小,電泳的速度就越快。
電滲透、表面滲流和表觀滲透是推動樣品遷移的另一重要動力。電滲流是毛細(xì)管中的溶劑在軸向直流電場作用下發(fā)生的一種定向流動。電滲入是由定域電荷引起的。定域電荷是離子或帶電基,它們牢固地粘結(jié)在管壁上,在電場作用下無法遷移。固定域電荷吸引溶液中的反號離子,并使溶劑與其組成的雙電層發(fā)生整體定向運(yùn)動(以及在電場作用下的碰撞),從而形成電滲流(在毛細(xì)管中電滲流呈平頭塞狀)。
在電泳條件下,毛細(xì)管區(qū)從陽極向陰極流動。通過 Zeta電位、雙電層厚度及介質(zhì)粘度等因素的影響,一般而言,雙電層越薄,粘度越小,電滲流值越大。