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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴(yán)格脫水?？梢郧逑吹魵埩舻膹?qiáng)極性雜質(zhì)，并對(duì)硅膠表面進(jìn)行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動(dòng)相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗。可洗去殘留的非極性雜質(zhì)，多次在()沖洗時(shí)多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強(qiáng)疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時(shí)候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽(yáng)離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強(qiáng)的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機(jī)物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時(shí)，柱中應(yīng)充滿或，柱連接處應(yīng)緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請(qǐng)勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時(shí)，如果壓力升高，有一種可能是燒結(jié)過(guò)的濾片被堵塞，此時(shí)應(yīng)更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會(huì)出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時(shí)，小心將柱頭接頭擰開(kāi)，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤(rùn)濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護(hù)、延長(zhǎng)柱壽命的作用。使用保護(hù)柱會(huì)失去一些柱效，這是值得的。

柱溫箱，在柱溫箱中有色譜柱，實(shí)際上分離是發(fā)生在色譜柱上，柱溫箱本身的保養(yǎng)和使用要點(diǎn)并不多說(shuō)。小探認(rèn)為，實(shí)際上柱溫箱是整個(gè)液相色譜系統(tǒng)中皮實(shí)的一個(gè)部件，只要保證接頭擰緊不漏氣，好像一萬(wàn)年都看不出來(lái)它出了什么問(wèn)題，要注意的是安捷倫的柱溫箱會(huì)有兩個(gè)控制溫區(qū)，左邊寫(xiě)著3 uL，右邊寫(xiě)著6 uL，一般情況下，我們要用3 uL的柱溫箱，一般情況下，我們要使用3 uL的那個(gè)，以減小儀器的延遲和擴(kuò)散。

探測(cè)器。探測(cè)器的種類很多，而且各有千秋，在此我們還是要找大家的紫外光(VWD)/二極管陣列(DAD)探測(cè)器。兩者均為紫外類檢測(cè)器，盡管光路設(shè)計(jì)不同，但基本原理是一致的。6.1探測(cè)系統(tǒng)中一個(gè)非常重要的部分是光源，俗稱燈，它是一種消耗品，就像家里的燈泡，用到一定程度就壞了。但家中的燈泡不能像家里的燈泡那樣點(diǎn)不亮?xí)r要更換，因?yàn)榉旁跈z測(cè)器中的燈是需要發(fā)射能量的，一旦能量衰減到一定程度，就會(huì)出現(xiàn)基線噪聲變大、靈敏度降低等一系列問(wèn)題。一般情況下，燈泡的壽命是2000 h，當(dāng)達(dá)到這一時(shí)，我們就特別注意燈泡的能量狀況，可以在儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能量測(cè)試”來(lái)判斷，測(cè)試結(jié)果將分別對(duì)低、高三個(gè)波長(zhǎng)段的能量進(jìn)行評(píng)估，一旦某一波長(zhǎng)段的結(jié)果顯示失敗，就表示要換燈，通常個(gè)失敗的是低波長(zhǎng)段。檢測(cè)器中的另一個(gè)重要部分是檢測(cè)器，也被稱為流通池。許多時(shí)候，大家關(guān)心的是檢測(cè)池是否被堵住，因?yàn)闄z測(cè)池一般不耐壓，所以一旦堵住，很容易造成損壞。

先要認(rèn)識(shí)到，一般國(guó)產(chǎn)其實(shí)不需要額外的過(guò)濾處理，直接使用是沒(méi)有問(wèn)題的。甚至某些固體顆粒雜質(zhì)，都可以從液相流路系統(tǒng)前端的過(guò)濾頭中排除。真正容易出現(xiàn)問(wèn)題的是水中的細(xì)菌。新制純水在室內(nèi)放置數(shù)天后會(huì)產(chǎn)生細(xì)菌，而這些細(xì)菌雖然肉眼看不到，卻足以堵塞柱狀填料顆粒的空隙，導(dǎo)致柱子迅速報(bào)廢。

色譜儀是一種易學(xué)難用的儀器，尤其注重儀器的正確使用。流體工作者接觸到流動(dòng)相，流動(dòng)相是引起液相色譜各種問(wèn)題的主要來(lái)源。液相色譜儀常見(jiàn)的故障有堵塞和漏漏。以下對(duì)這兩點(diǎn)分別展開(kāi)討論。(注：流動(dòng)相以為例，色譜柱以C18為例)“堵”的現(xiàn)象是柱壓異常升高，直接原因是流路不暢。造成“堵塞”的原因：流動(dòng)相中的細(xì)菌污染。阻塞主要發(fā)生在色譜柱前端，流動(dòng)相中存在雜質(zhì)，細(xì)菌是雜質(zhì)的主要來(lái)源。長(zhǎng)時(shí)間，濾頭粘附細(xì)菌，造成泵液不能正常工作這一問(wèn)題的解決辦法就是保證水的可靠性。以下是兩種建議方法：(1)好購(gòu)買實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)，既方便又可靠，質(zhì)量也放心。的缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴。(2)成箱購(gòu)買市售品牌純凈水，如怡寶或娃哈哈500 ml，這些水的質(zhì)量足以滿足液相色譜的要求。有一個(gè)細(xì)節(jié)值得注意：在絕大多數(shù)書(shū)籍中，凡談到配制流動(dòng)相到都要進(jìn)行過(guò)濾的步驟。

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固體萃取柱的應(yīng)用：

單純固相萃取可以手工完成，即在固相萃取柱的上端連接一個(gè)注i射器，萃取柱通過(guò)擠壓將萃取柱中的液體排出。此外，也可采用正壓力或負(fù)壓力的固相萃取設(shè)備對(duì)批量樣品進(jìn)行固相萃取。伴隨著技術(shù)的發(fā)展，樣品量的不斷增加，越來(lái)越多的分析實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始采用自動(dòng)固相萃取儀，尤其是多通道固相萃取儀。

固相萃取儀是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附到樣品基體和干擾物，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附達(dá)到分離目標(biāo)化合物的目的(即樣品的分離、純化和濃縮)，旨在減少樣品基質(zhì)的干擾，提高檢測(cè)靈敏度，其應(yīng)用于各種食品安全檢測(cè)、農(nóng)產(chǎn)品殘留監(jiān)測(cè)、醫(yī)i藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)、商品檢驗(yàn)、自來(lái)水及化工實(shí)驗(yàn)室。

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