微重力三維細(xì)胞培育在國內(nèi)似乎用的人不是許多,本文在此就簡單介紹一下該技術(shù)的原理，如果您對此有興趣，請與我們聯(lián)系: 蘇州乾蕓儀器科技有限公司 電子郵箱:[email protected] !當(dāng)培育皿充溢培育基并且旋轉(zhuǎn)時(shí)，培育基像固體一樣圍著水平軸旋轉(zhuǎn)。為使得本文理解更簡單，更貼近從事細(xì)胞培養(yǎng)工作人員實(shí)際所關(guān)心的問題，本文將就三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以問答的形式進(jìn)行展開、描述如下。

       Synthecon INC公司于 1990 年創(chuàng)立，創(chuàng)立者為 NASA 細(xì)胞研究計(jì)劃中的發(fā)明人。得到 NASA 的專利和技術(shù)轉(zhuǎn)移，重新設(shè)計(jì)了專利的 Rotary Cell Culture System (RCCS) ，適用于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、研發(fā)和其他臨床的研究上。傳統(tǒng)靜態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)是在培養(yǎng)瓶或皿中進(jìn)行的。無論是細(xì)胞或組織均生長在二維平面空間并接觸玻璃或塑料表面。如前所述，RCCS生物反應(yīng)器供給了非常好的質(zhì)量傳遞和低機(jī)械應(yīng)力容許了3D聚合物的構(gòu)成。這樣的方式會影響細(xì)胞中基因的表達(dá)且無法持續(xù)生長及分化。同時(shí)，平面培養(yǎng)的細(xì)胞還會生“去分化”(dedifferentiation)現(xiàn)象，使培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸失去其來源組織的許多生理特征。而大部分動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中，細(xì)胞或組織是有物理的外力而懸浮的，有許多包括液態(tài)剪切力在內(nèi)的因素會導(dǎo)致細(xì)胞及組織 損傷。

Synthecon3D可重復(fù)旋轉(zhuǎn)三維細(xì)胞培養(yǎng)RCCS-4HD

       可重復(fù)使用三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，含有4個(gè)培養(yǎng)皿連接頭，每兩只培養(yǎng)皿可獨(dú)立控制，適用于同時(shí)進(jìn)行多組細(xì)胞或組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)或?qū)Ρ葘?shí)驗(yàn)！

主機(jī)座X1，控制器X1，說明書X1，培養(yǎng)皿4pcs(一次性及可重復(fù)用培養(yǎng)皿均可用)

RCCS-4HD可重復(fù)三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)

備注：可重復(fù)是指培養(yǎng)皿除可以通過射線滅菌外，還可以通過高溫、高壓滅菌處理

2 適配一次性培養(yǎng)皿、可重復(fù)培養(yǎng)皿以及STLV培養(yǎng)皿等所有規(guī)格培養(yǎng)皿

3 附送培養(yǎng)皿規(guī)格有1ml，2ml，4ml，10ml供選擇

4 通過使用不同規(guī)格的培養(yǎng)皿，可實(shí)現(xiàn)各種細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)（含骨組織）以及支架培養(yǎng)等

5 同時(shí)多可培養(yǎng)4組樣品，根據(jù)細(xì)胞生長不同需求，可每兩組獨(dú)立控制轉(zhuǎn)速

     RCCS 是一種顛覆傳統(tǒng)的三度空間微重力培育體系。其運(yùn)用培育盤或培育管柱進(jìn)行培育，將培育液、細(xì)胞或安排一同參加培育盤或培育管柱中，并去掉悉數(shù)氣泡。同時(shí)，平面培育的細(xì)胞還會發(fā)作“去分解”(dedifferentiation)景象，使培育的細(xì)胞逐步失掉其來源安排的很多生理特征。培育盤或培育管柱裝置于具旋轉(zhuǎn)馬達(dá)之基座上，內(nèi)部安排、細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)塊因旋轉(zhuǎn)切線力氣及重力兩層影響下而堅(jiān)持懸浮狀況。

 成長其間的細(xì)胞或安排是以清閑落體的狀況懸浮，沒有攪拌器、氣泡等破壞性壓力，故安排在培育液中得以清閑降低、翻轉(zhuǎn)并與培育液充沛混合，其容器內(nèi)各方向的力氣到達(dá)平衡，所以細(xì)胞/ 安排不會遭到單一方向的力氣影響，可朝恣意方向均勻成長，是市面上僅有可使細(xì)胞清閑成長分化，添加細(xì)胞增殖速率，減少細(xì)胞逝世和有用添加細(xì)胞商品排泄的體系。RCCS這樣的體系還供給了exvivo培育環(huán)境，研討者可使用RCCS以討論微環(huán)境因子，對細(xì)胞分解和功用的影響。

1 可重復(fù)是指培養(yǎng)皿除可以通過射線滅菌外，還可以通過高溫、高壓滅菌處理

4. 細(xì)胞是不是在RCCS生物反應(yīng)器的一個(gè)本地逗留？ 不，細(xì)胞和細(xì)胞調(diào)集體會在培養(yǎng)基中漂浮,這是生物反應(yīng)器中觀察到的高物質(zhì)傳輸?shù)闹匾蛩刂弧?

5.怎樣堅(jiān)持微重力生物反應(yīng)器里的溫度？ 生物反應(yīng)器有必要放在恒溫箱里，恒溫箱的溫度可以設(shè)定和維持在37℃。

6.我怎樣確保培養(yǎng)所需氧氣？

      正如前面說到(疑問5)，生物反應(yīng)器是放置在恒溫箱里的。根據(jù)培養(yǎng)所需,通過硅樹脂氧合器，恒溫箱中的空氣會渙散入培養(yǎng)皿中。Arollerbottleculturedeviceisnot3Dcellculture。如果有較大的培養(yǎng)容器，有泵可以使恒溫箱的空氣供給滿足培養(yǎng)所需。由于所有的氣體傳輸是通過渙散結(jié)束，因此全過程不會發(fā)作氣泡和湍流。

7.培養(yǎng)容器應(yīng)該以啥速度旋轉(zhuǎn)？

      這取決于細(xì)胞聚合體的直徑。當(dāng)容器翻滾時(shí)，細(xì)胞聚合體加速，直到他們抵達(dá)堆積速度，而該速度取決于細(xì)胞聚合體的大小。Synthecon3D可重復(fù)旋轉(zhuǎn)三維細(xì)胞培養(yǎng)RCCS-4HD可重復(fù)使用三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，含有4個(gè)培養(yǎng)皿連接頭，每兩只培養(yǎng)皿可獨(dú)立控制，適用于同時(shí)進(jìn)行多組細(xì)胞或組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)或?qū)Ρ葘?shí)驗(yàn)。根據(jù)斯托克斯方程，沉降速率跟著細(xì)胞聚合體半徑的平方而增加。因此，跟著聚合體體積上的增加，它們沉降的更靈敏，一同為了防止細(xì)胞聚合體與培養(yǎng)壁的磕碰有必要增加旋轉(zhuǎn)速度。因此，一開始可能以慢速旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)，例如7rpm，當(dāng)細(xì)胞聚合體在體積上增加并且變得可見，再增加旋轉(zhuǎn)的速度。

傳統(tǒng)靜態(tài)細(xì)胞培育是在培育瓶或皿中進(jìn)行的。無論是細(xì)胞或安排均生長在二維平面空間并觸摸玻璃或塑料外表。這么的方法會影響細(xì)胞中基因的表達(dá)且無法繼續(xù)生長及分解。同時(shí)，平面培育的細(xì)胞還會發(fā)作“去分解” (dedifferentiation) 景象，使培育的細(xì)胞逐步失掉其來源安排的很多生理特征。同時(shí)，平面培養(yǎng)的細(xì)胞還會生“去分化”(dedifferentiation)現(xiàn)象，使培養(yǎng)的細(xì)胞逐漸失去其來源組織的許多生理特征。而大部分動態(tài)培育體系中，細(xì)胞或安排是有物理的外力而懸浮的，有很多包括液態(tài)剪切力在內(nèi)的因素會致使細(xì)胞及安排損傷。

RCCS 是一種推1翻傳統(tǒng)的三度空間微重力培育體系。其使用培育盤或培育管柱進(jìn)行培育，將培育液、細(xì)胞或安排一起參加培育盤或培育管柱中，并去掉一切氣泡。培育盤或培育管柱安裝于具旋轉(zhuǎn)馬達(dá)之基座上，內(nèi)部安排、細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)塊因旋轉(zhuǎn)切線力氣及重力兩層影響下而堅(jiān)持懸浮狀況。跟著細(xì)胞或安排生長，旋轉(zhuǎn)速度可做調(diào)整，細(xì)胞構(gòu)成團(tuán)塊以后，有必要進(jìn)步轉(zhuǎn)速使其不會沉降而碰觸底部。旋轉(zhuǎn)的意圖是要讓一切細(xì)胞均勻交流營養(yǎng)和氣體，而且細(xì)胞和細(xì)胞之間可有滿足的觸摸，有利于細(xì)胞集合。由于所有的氣體傳輸是通過渙散結(jié)束，因此全過程不會發(fā)作氣泡和湍流。另外，不論是培育盤或培育管柱背側(cè)均具有硅膠制成的換氣膜以利進(jìn)行1氣體交流，使細(xì)胞 / 安排得到充分氧氣及排除代謝后的廢氣。