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等溫核酸試劑盒
RPA的原理;
重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非??欤话憧稍谑昼娭畠?nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。
重組酶聚合酶擴增技術(RPA)是2006年由英國科學家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復印,恒溫條件下短時間內(nèi)實現(xiàn)靶基因大量擴增,既可以擴增DNA,也可以擴增RNA。RPA技術具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點,是目前很有望替代PCR技術的核酸等溫擴增方法,在基層現(xiàn)場診斷中,具有廣闊的應用前景。
相對來說RPA是很好的恒溫擴增法,可在較低溫下恒溫擴增,不需要復雜儀器設備,操作簡單、反應時間短,特異性好、靈敏度高,可采用電泳、熒光、側向流試紙等多種方式檢測擴增產(chǎn)物
核酸試劑盒
英國TwistDx 公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術公司。該公司通過突破等溫DNA擴增,開發(fā)的重組酶聚合酶擴增技術(RPA),被譽為DNA診斷領域的革命性創(chuàng)新。
RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈 DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應溫度在37°C左右。
側向流分析(LFIA)具有成本低、響應快、易于使用和高通量等優(yōu)點。但LFIA與其他分析方法相比靈敏度較低,限制了其在不同領域的實際應用。進而迫切需要一種新的標記分子,不僅易于合成,而且在信號產(chǎn)生和放大方面具有的物理/化學性質。普魯士藍納米粒子(PBNP)具有良好的生物相容性和其它的性質,如低成本、高表面體積比、易于合成和表面改性等,一直受到生物醫(yī)學研究者的廣泛關注。