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等溫核酸試劑盒
重組酶聚合酶擴增技術(RPA)是2006年由英國科學家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復印,恒溫條件下短時間內(nèi)實現(xiàn)靶基因大量擴增,既可以擴增DNA,也可以擴增RNA。RPA技術具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點,是目前很有望替代PCR技術的核酸等溫擴增方法,在基層現(xiàn)場診斷中,具有廣闊的應用前景。
相對來說RPA是很好的恒溫擴增法,可在較低溫下恒溫擴增,不需要復雜儀器設備,操作簡單、反應時間短,特異性好、靈敏度高,可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測擴增產(chǎn)物
核酸試劑盒
核酸檢測,是通過檢測病毒的遺傳物質(zhì)核酸而做出診斷,采用RNA逆轉(zhuǎn)錄反應和PCR技術,簡單說就是使用生物技術抓取病毒獨有的核酸基因片段,然后大量復印,把它們的特點放大,這樣就可以輕松檢測到病毒了。核酸檢測試劑盒的設計本身就是針對新型冠狀病毒特有的基因片段,并且還做了特異性驗證,用試劑盒去檢測其他相似的病毒如SARS等,檢測結(jié)果均是陰性,只有檢測病毒時才是陽性,這就確保了試劑盒的特異性,從而不會誤診。
樣本采集質(zhì)控重要性
樣本采集作為核酸檢測的首步,其中涉及的采樣耗材和病毒保存液的對檢測結(jié)果的準確性至關重要,不合格樣本會直接影響檢驗結(jié)果。在新冠核酸檢測中,不合格樣本通常是由于采樣問題和采樣用具問題導致的。
合格的病毒保存液目前主要要求兩點:
1.保證病毒的充分滅活,防止采樣、運輸和檢測過程的風險。
2.保證病毒核酸(RNA)在采集、運輸過程中的穩(wěn)定性,保證檢測結(jié)果的準確性,防止樣本運輸保存過程中降解導致檢測的“假陰性”。
RPA反應的適宜溫度在37℃~42℃之間,無需變性,常溫下即可反應,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要溫控設備,RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。RPA檢測的靈敏度很高,能夠?qū)⒑哿康暮怂?/span>(尤其是DNA)模板擴增到可檢出水平,從單個模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。無需復雜樣品處理,即可實地檢測;既可擴增DNA也可擴增RNA,省去額外的cDNA合成步驟;檢測方式多樣:終點檢測、對擴增過程進行實時監(jiān)控或通過側(cè)流層析試紙條(LFD)讀取結(jié)果。
試劑盒包括兩類:①.TwistAmp凍干研發(fā)試劑盒(包括TwistAmp Basic試劑盒、TwistAmp exo 試劑盒和TwistAmp nfo 試劑盒共三種);②. TwistAmp液態(tài)研發(fā)試劑盒(包括TwistAmp Liquid Basic 試劑盒和TwistAmp Liquid exo 試劑盒共兩種)
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