低溫生物菌種的原理

菌種保藏有多種方法，其原理大多大同小異，主要是運用一些方式盡量降低生物體內(nèi)的代謝，達到延長生命，減少變異的目的。通常采用的方法為低溫、缺氧、干燥。

低溫主要對菌種產(chǎn)生兩方面的影響，首先，較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活，降低新陳代謝，達到保藏菌種的目的。其次，低溫同時會導致菌體誘發(fā)菌絲自溶機制，如果降溫過程失誤，同樣會造成機體的機械損傷和溶質(zhì)損傷。

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。

低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個因素而設計的。

                                                           低溫生物菌種了解多少？

研究在低溫條件下生命活動的生物化學規(guī)律的新興學科，是低溫生物學的重要基礎。例如，在某些冬眠狀態(tài)的昆蟲體液中，甘油含量可高達25%，以致在-35℃的狀況下也不會冰凍。另一方面，利用低溫下變化減慢，來研究在常溫下變化較快的一些生物化學反應。如在酶的催化、蛋白質(zhì)和核酸在溶液中的空間構象變化中。某些中間變化常溫下在千分之一秒的時間內(nèi)即可完成，用一般方法難以探討，而在含有添加劑使溫度降至-40℃左右的溶液中，反應速度大為減慢就可用常規(guī)方法進行研究。

分離篩選低溫生物菌種的基本程序

流程

4.1 優(yōu)良糖化酶菌株的分離與篩選

融化培養(yǎng)基→倒平板→打散孢子團粒→梯度稀釋→涂布平板→培養(yǎng)觀察→滴加碘液→挑菌落→接種→培養(yǎng)→糖化酶活力測定→菌種保存

4.2 酸乳制品中的乳酸菌的分離

制培養(yǎng)基→倒平板→梯度稀釋→涂布平板→培養(yǎng)觀察→挑菌落→接牛乳管→培養(yǎng)觀察→傳代培養(yǎng)→挑選凝乳管→乳酸測定→菌種保存

5 步驟

優(yōu)良糖化酶菌株的分離與篩選

（1）融化淀粉察氏培養(yǎng)基，稍冷后倒平板與斜面數(shù)個。

（2）取種曲少許，加入10mL帶玻璃球的無菌生理鹽水的三角瓶中，用力振蕩打散孢子團粒，使之形成均勻的孢子懸浮粒。然后將其用無菌紗布過濾于無菌試管中。

（3）將上述濾液以10倍稀釋法知釋至10-7，取后3個稀釋度的稀釋液各0.2mL，于淀粉察氏培養(yǎng)基平板上用無菌涂布器分別依次涂布2至3個皿，30℃培養(yǎng)1~2d。

（5）性能測定：測定各菌落的糖化酶活力。

申請專利時，有新的低溫生物菌種的必須要辦理菌種保藏嗎？

如果專利得到了審批專利權人卻沒有構成專利的新菌種要件，顯而易見是需要保藏菌種的。發(fā)酵飼料原料與配方:配制好的發(fā)酵飼料1000公斤，水350-400公斤(夏天350，冬天400)，菌種飼料發(fā)酵劑5公斤,100-200克納豆菌。 制作稀釋活化發(fā)酵液:將菌種5公斤飼料發(fā)酵劑和100-200克納豆菌倒入350-400公斤水中攪拌均勻制成活化發(fā)酵液。 將制成的活化發(fā)酵液與1000公斤發(fā)酵飼料混合均勻，濕度以手捏成團不滴水，一觸即散為宜。有攪拌機的大型養(yǎng)殖場將活化發(fā)酵液慢慢加入飼料中攪拌均勻即可;沒有攪拌機的養(yǎng)殖戶將活化發(fā)酵液慢慢少量噴到飼料上，用鐵鍬攪拌均勻，注意:不能有團塊、水結塊，用手將團塊、水結塊搓散攪拌均勻。 大型養(yǎng)殖場可以將配置好的飼料在地面壓實堆成垛或者裝入水泥池壓實，用塑料薄膜密封或者使用厚實的不透氣的塑料碎團塊、水結塊。