【廣告】
你對制備色譜陌生嗎?還不進(jìn)來看看它的特點(diǎn)
很多初接觸色譜領(lǐng)域的朋友對制備色譜這個名詞比較陌生。其實(shí),在化學(xué)化工醫(yī)學(xué)等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜,換句話說,將分析色譜的進(jìn)樣量增大,同時得出大量的所需物質(zhì)(餾分)的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。而制備色譜系統(tǒng)則是利用制備色譜的思想能得到純化物質(zhì)的多個分析測試設(shè)備聯(lián)用的總稱。 分析色譜是制備色譜的基礎(chǔ)。當(dāng)我們在分析色譜上取得了良好的分離效果時,可以將其放大,應(yīng)用到制備色譜上,由此,我們需要考慮調(diào)整上樣量,流速,梯度:
1.上樣量的調(diào)整: 他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內(nèi)徑有關(guān):
具體關(guān)系時;制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長/分析柱長*制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方;
2.流速的調(diào)整:
制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方;
3.梯度的調(diào)整:
制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速;
色譜分離基本原理
在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動相。 液相色譜的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的。使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。 由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,液相色譜使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。
半制備液相色譜儀的特點(diǎn)
半制備液相色譜儀更換泵頭簡單,可輕易打開泵頭,進(jìn)行簡單的維護(hù)和更換,輕松轉(zhuǎn)換分析和半制備系統(tǒng),保證精密輸液泵的精度,適用于分析、石油化工、商品檢驗(yàn)、環(huán)境科學(xué)和生命科學(xué)等領(lǐng)域,是質(zhì)量控制和方法開發(fā)測試的理想工具。在各個領(lǐng)域廣泛使用中所取得的經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)用于新技術(shù)開發(fā),不斷充實(shí)了制備所要求的各種功能。
什么是液相色譜?
液相色譜的定義是二十世紀(jì)早期由俄羅斯植物學(xué)家 MikhailS. 茨維特提出的。他先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來分離從植物中提取的化合物(樹葉色素)。茨維特用顆粒填滿開口的玻璃柱。他發(fā)現(xiàn)兩種特殊的材料,粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品(混勻植物葉的溶劑提取物)倒入柱中,并讓樣品流過顆、粒床。隨后加入純?nèi)軇kS著樣品由于重力自上而下流過柱子,可看到不同顏色的譜帶被分開,因?yàn)橛行┙M分比另外一些移動得快。他將這些分開的不同顏色的譜帶與樣品中原有的不同化合物相關(guān)聯(lián)。他還根據(jù)每一種化合物對填料的化學(xué)親和性強(qiáng)弱,提出了分析這些化合物的分離規(guī)律。與顆粒填料有較強(qiáng)親和性的化合物移動慢,與溶劑有較強(qiáng)親和性的化合物移動快。這個過程可這樣描述:樣品中的化合物在流動的溶劑(流動相)與固體顆粒(固定相)間的分布不一樣。這樣使每一種化合物以不同的速度移動,從而產(chǎn)生了化合物之間的分離。