胎牛血清使用方法：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清，常使用的澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，我們在實(shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的Gibco FBS或者20%的澳洲胎牛血清，要根據(jù)具體 細(xì)胞選擇合適的澳洲胎牛血清濃度。

抗體保存注意事項(xiàng)：大部分抗體的運(yùn)輸條件：一般的運(yùn)輸過程需要1-2 周的時(shí)間，所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸，那么收到時(shí)抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸！特殊抗體的保存條件：1. 酶聯(lián)抗體：永遠(yuǎn)保存在4 度，避免凍起來。否則會導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失。2. 偶聯(lián)抗體：所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體，對光極為敏感，因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的！

  血清中的沉淀物對細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響？污染。磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭duan，研究者可能會在血清中觀察到一些 絮狀的沉淀，因此就會比較警覺的去做無菌試驗(yàn)，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會觀察到更多的絮狀沉淀，因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時(shí)往往可以看到一些可以運(yùn)動的小黑點(diǎn)，因此就更加確認(rèn)是血清被污染了。于是，研究者就會花費(fèi)更多的時(shí)間和精力來和生產(chǎn)商確認(rèn)，但zui終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生，我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌，而是將血清加到瓊脂板上進(jìn)行培養(yǎng)以觀察是否有細(xì)菌生長。另外，也可以進(jìn)行革蘭氏染色，在油鏡下觀察，以確認(rèn)是否有污染。

胎牛血清的使用注意事項(xiàng)：

 1、解凍血清時(shí)，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。

C至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

 2、解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生.

 3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。