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伴隨著現(xiàn)代工業(yè)技術(shù)的不斷創(chuàng)新與進(jìn)步，液相色譜作為色譜研究的一種非常有效的手段，在我國工業(yè)基地得到了廣泛的應(yīng)用。HPLC更是分離小分子氣體等有機(jī)化合物的必備儀器，而液相色譜儀憑借其、高靈敏度、高分辨率，能夠適應(yīng)多種分離條件，并采用固定相和流動相對有機(jī)化合物進(jìn)行充分處理。所以 HPLC定性分析對于現(xiàn)代工業(yè)的進(jìn)步和發(fā)展具有重要的作用，同時(shí)也加強(qiáng)了我國對、食品以及化工領(lǐng)域的滲透。

液相色譜在工業(yè)上的分析中，通常是由操控者對未知組進(jìn)行定性分析，對已知的組別進(jìn)行定量分析。本對液相色譜定性分析方法作了簡要的論述和分析，努力使液相色譜的過程方法能夠?yàn)?HPLC所用領(lǐng)域的工作提供一些幫助。HPLC定性分析方法對高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、不易揮發(fā)、不易分解、分子量大的有機(jī)化合物的分析具有十分顯著的效果，對工業(yè)農(nóng)業(yè)中的有機(jī)化合物也有基礎(chǔ)的分析。

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遠(yuǎn)古羅馬時(shí)期，人們就知道將一滴含有混合色素的溶液滴在一塊布或一片紙上，通過觀察溶液展開所形成的同心圓環(huán)，對染料和色素進(jìn)行分析。事實(shí)上，這種簡單的操作已經(jīng)運(yùn)用了現(xiàn)代色譜的基本原理。

19世紀(jì)中期，德國化學(xué)家 Runge對古羅馬人的這一做法進(jìn)行了重大改進(jìn)，使其具有很好的重復(fù)性和定量能力，使得鹽溶液可以在紙上分離；此外，化學(xué)家Goppalsr-oeder也將染料和動植物色素分離在長條形紙上，這些研究標(biāo)志著紙色譜法的建立，并逐漸發(fā)展成現(xiàn)代色譜技術(shù)。

在1903年的華沙自然科學(xué)學(xué)會生物學(xué)會會議上，俄國植物學(xué)家 Tswett提出了利用吸附原理分離植物色素的新方法，這是現(xiàn)代色譜學(xué)的開端。俄國植物學(xué)家 Tswett在1903年召開的華沙自然科學(xué)學(xué)會生物學(xué)會會議上發(fā)表。把碳酸鈣放入直立的玻璃柱中，從頂端注入植物色素的石i油醚浸取液，再用溶劑沖洗，使溶質(zhì)在柱的不同部位形成色帶，首i次向人們公開展示了用色譜法提純的色素溶液以及色譜圖顯示的彩色環(huán)帶柱管。Tswett把這種方法命名為色譜，填充管稱為固定相，沖洗劑稱為流動相。

SCIEX毛細(xì)管電泳儀代理——廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司可為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)所需要的SCIEX耗材

電泳基本原理：

雙層：

雙電離子層是兩相分離的表面由相對固定和游離的兩部分組成。

雙電離子層是異號表面的離子層，任何浸入液體中的界面都會形成雙電層。對于毛細(xì)管電泳，在毛細(xì)管電泳中，其表面和壁面均存在雙電層。

Zeta電位：

介電性溶液中的任何帶電粒子都可以看作是雙電層系統(tǒng)的一部分，異號的帶電離子被異號的帶電離子中和，異號離子中有些被不可逆的吸附到離子上，而其他離子游離在附近，擴(kuò)散到電介質(zhì)中進(jìn)行離子交換。「定」離子有一個(gè)切面，這個(gè)切面與離得近的離子間的電位稱為 Zeta電位。

毛細(xì)管電泳中，樣品分子的遷移是有效電泳濁度和電滲流清潔度的綜合表現(xiàn)，而此時(shí)的清凈度被稱為表觀清凈。由于石英(或玻璃)毛細(xì)管表面的硅羥基解離，在大多數(shù)水溶液中都會產(chǎn)生一種負(fù)的定域電荷，并指向負(fù)極。毛細(xì)管中的電滲率比電泳速度大一個(gè)數(shù)量級，因此樣品組分可以實(shí)現(xiàn)同向泳動。在電滲和電泳中，正離子的運(yùn)動方向是一致的，所以它首先流出。中立分子與電滲流同速，隨電滲入。負(fù)離子在中性顆粒后面流出，其運(yùn)動方向與電滲方向相反。pH值與電滲流有密切關(guān)系。電滲透受 Zeta電位的影響， Zeta電位由毛細(xì)管壁表面的電荷決定，而電荷又受緩沖溶液的 pH值影響，因此電滲流的值是緩沖溶液 pH值的函數(shù)，一般隨 pH值的增加而增大，到中性或堿性時(shí)值會變得很大。另外，毛細(xì)管洗滌過程、電泳緩沖液組成、粘度、溫度等對管壁上解離的影響也會發(fā)生變化。電磁以及許多能與毛細(xì)管表面作用的物質(zhì)，如表面活性劑、蛋白質(zhì)等，對電滲流有很大影響。

電泳法作為一種伴隨電泳產(chǎn)生的電動現(xiàn)象，在電泳法中起重要作用。大多數(shù)情況下，電滲流速度是電泳速度的5-7倍。毛細(xì)管電泳(CE)利用電滲流，使中性分子、正負(fù)離子向一個(gè)方向發(fā)生差速遷移，在一次 CE過程中同時(shí)完成正負(fù)離子的分離測定。電滲流的大小和方向影響著 CE分離的效率、選擇性和分離程度，因而成為分離條件優(yōu)化的重要參數(shù)。CE分離的重復(fù)性(遷移時(shí)間和峰面積)受電滲流的微小變化嚴(yán)重影響。因此，電滲流的控制是 CE的一項(xiàng)重要工作。控制電滲流的方法主要是改變緩沖液的組成和濃度、改變緩沖液的 pH值、添加添加劑、對毛細(xì)管內(nèi)壁進(jìn)行改性-物理或化學(xué)方法上涂覆及動態(tài)去活；外加徑向電場；改變溫度等。