Elisa試劑盒注意事項

Elisa試劑盒解凍與存放：-20℃取出后建議放入2～8℃冰箱中解凍約，每隔一段時間輕輕搖晃均勻，不可直接放入溫度較高處解凍，避免因溫度改變太大，造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀，其質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶，建議無菌分裝,再放回冷凍，避免反復(fù)凍融。4℃長時間保存后的變性脂蛋白及纖維蛋白，形成絮狀物質(zhì)變差。

Elisa試劑盒的安全性

8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

2. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。

3. 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

4. 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

5. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

不正常的標準曲線

1  錯誤的方法重懸標準品  加入正確量的溶液重懸標準品，重懸充分

2  標準品稀釋錯誤  按照說明書要求稀釋標準品

3  標準品污染  使用一次性的滅菌吸頭， 標準品貯存于2-8 ℃

4  錯誤的倍比稀釋步驟  按照說明書倍比稀釋標準品

5  波長選擇錯誤 TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長為450nm，后者為492nm。雙波長比色分析優(yōu)于單波長。

6  標準品混用  不同批號試劑勿混用

7  試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高，標準品失活  盡量縮短運輸時間，夏季應(yīng)放冰塊降溫

8  ELISA未終止而直接檢測450nm和620nm TMB顯色需終止后檢測，否則會出現(xiàn)620nm比450nm讀數(shù)高的現(xiàn)象。（數(shù)值仍有梯度規(guī)律）