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ELISA試劑盒的測定原理
測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷劑離不開好的原料,如抗原,酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原,而則為純化抗原動物后獲得的多和使用雜交瘤技術(shù)得到的,而抗原或的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或及其酶結(jié)合物等測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
Elisa試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的米松(Dexamethasone,DEX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的米松藥品和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗米松藥類,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含米松藥品含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中米松藥品的殘留量。
ELISA試劑盒主要實驗原理
·包被:抗原或者能以物理性吸附于固相載體表面,原因是蛋白質(zhì)和聚乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原反應(yīng)等活性;
·標(biāo)記:抗原或者可通過共價鍵與酶連接成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其活性和酶的催化特點;
·顯色:酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或者結(jié)合后,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計算抗原或者的相對含量。