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低溫生物菌種的分離方法有哪些?
先將所需的種藥用真菌采集回來,選取新鮮、個(gè)體大、壯實(shí)、中齡及無病蟲害的子實(shí)體(或菌核、菌索),作為分離用的材料。若為子實(shí)體,取其菌蓋或菌柄組織;若為菌核,取其全部或部分(如茯苓)菌核;若為菌索,取其部分根狀菌索(如蜜環(huán)菌)。再用0.1 %或75 %酒精進(jìn)行表面消毒2 分鐘,用無菌水(或冷開水)沖洗數(shù)次,洗凈殘留的藥液后切成小塊。,然后,放入PDA 培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)皿上,置24 ~26℃溫度下,培養(yǎng)5 ~ 7 天。在分離的真菌組織周圍見長有白色菌絲時(shí),應(yīng)及時(shí)將菌絲移至斜面試管培養(yǎng)基上,再置溫度24 ~26 ℃下培養(yǎng)7~10 天,即得純菌種。所得的純菌種還可繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)或保藏。
低溫生物菌種了解多少?
研究在低溫條件下生命活動(dòng)的生物化學(xué)規(guī)律的新興學(xué)科,是低溫生物學(xué)的重要基礎(chǔ)。例如,在某些冬眠狀態(tài)的昆蟲體液中,甘油含量可高達(dá)25%,以致在-35℃的狀況下也不會冰凍。另一方面,利用低溫下變化減慢,來研究在常溫下變化較快的一些生物化學(xué)反應(yīng)。如在酶的催化、蛋白質(zhì)和核酸在溶液中的空間構(gòu)象變化中。某些中間變化常溫下在千分之一秒的時(shí)間內(nèi)即可完成,用一般方法難以探討,而在含有添加劑使溫度降至-40℃左右的溶液中,反應(yīng)速度大為減慢就可用常規(guī)方法進(jìn)行研究。
低溫生物菌種篩選過程及應(yīng)用價(jià)值
分離(separation)就是將一個(gè)混雜著各種微生物的樣品通過分離技術(shù)區(qū)分開,并按照實(shí)際要求和菌株的特性采取迅速、準(zhǔn)確、有效的方法對他們進(jìn)行分離、篩選,進(jìn)而得到所需微生物的過程。菌株分離、篩選(screening)雖為兩個(gè)環(huán)節(jié),但卻不能絕然分開,因?yàn)榉蛛x中的一些措施本身就具有篩選作用。工業(yè)微生物產(chǎn)生菌的篩選一般包括兩大部分:一是從自然界分離所需要的菌株,二是把分離到的菌株進(jìn)一步純化并進(jìn)行代謝產(chǎn)物鑒別。 ? {cF'RB. 在實(shí)驗(yàn)工作中,為使篩選達(dá)到事半功倍的效果,總的說來可從以下幾個(gè)途徑進(jìn)行收集和篩選: 4jisW}%L3
(1)向菌種保藏機(jī)構(gòu)索取有關(guān)的菌株,從中篩選所需菌株。 ^ 5u}
(2)由自然界采集樣品,如土壤、水、動(dòng)植物體等,從中進(jìn)行分離篩選。 O|%> <I? I
(3)從一些發(fā)酵制品中分離目的菌株,如從醬油中分離蛋白酶產(chǎn)生菌,從酒醪中分離淀粉酶或糖化酶的產(chǎn)生菌等。該類發(fā)酵制品經(jīng)過長期的自然選擇,具有悠久的歷史,從這些傳統(tǒng)產(chǎn)品中容易篩選到理想的菌株。 r N$_(%m_N
菌株的分離和篩選一般可分為采樣、富集、分離、產(chǎn)物鑒別幾個(gè)步驟。 8*4X%a=O f
含微生物樣品的采集 Q?7U iTZ
自然界含菌樣品極其豐富,土壤、水、空氣、枯枝爛葉、植物病株、爛水果等都含有眾多微生物,種類數(shù)量十分可觀。但總體來講土壤樣品的含菌量很多。 G ^H Z4jg